柑橘体细胞杂种的核质遗传鉴定与分析

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柑橘是世界上重要的果树。原生质体融合技术能有效克服柑橘有性杂交过程中遇到的多胚性、雌和/或雄性器官败育等生殖障碍,为柑橘品种改良提供了新的途径。对柑橘体细胞杂种进行核质遗传研究,有利于从遗传本质上认识柑橘体细胞杂种,研究其核质互作,了解其核质组成对体细胞杂种田间表现的影响,为选配融合亲本提供理论指导,为柑橘体细胞杂种应用于实践奠定基础。本研究采用SSR、cpSSR和CAPS标记对10个柑橘属间、种间体细胞杂种进行核质遗传鉴定和分析。主要结果如下: 1.融合植株的倍性测定:在所有融合组合中,红橘+枳橙、丹西红橘+枸头橙、朋娜+粗柠檬、金诺橘+本地早橘四个组合的再生植株均为四倍体;丹西红橘+粗柠檬和佩奇橘柚+伏令夏橙2个组合的再生植株既有二倍体也有四倍体;金诺橘+凤梨甜橙、金诺橘+锦橙、金诺橘+枸头橙、默科特橘橙+暗柳橙四个融合组合的再生植株为二倍体。 2.经SSR鉴定:红橘+枳橙、丹西红橘+枸头橙、朋娜+粗柠檬、金诺橘柚+本地早橘为四倍体体细胞杂种,金诺橘+枸头橙为二倍体杂种,其他组合为胞质杂种。在金诺橘+枸头橙、佩奇橘柚+伏令夏橙杂种植株中检测到双亲没有的新带型;红橘+枳橙杂种植株中检测到特征带的丢失现象;而在丹西红橘+枸头橙的杂种植株中,既检测到双亲没有的带型,也检测到亲本特征带的丢失现象。表明融合过程中存在遗传重组现象。 3.经cpSSR鉴定:本试验中所检测的体细胞杂种,其叶绿体表现为单向随机遗传,但在“红橘+枳橙”组合的6号再生单株中检测到双亲叶绿体共存现象。 4.“红橘+枳橙”、“丹西红橘+枸头橙”、“朋娜+粗柠檬”的CAPS分析中,线粒体DNA均表现倾向来源于悬浮系亲本。而对朋娜+粗柠檬的测序结果表明,该组合再生植株mtDNA发生了重组。 本文还对柑橘体细胞杂种的遗传变异、SSR方法的优缺点和mtDNA向核转移现象进行了讨论。
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