膜蛋白在生物体内有着控制物质进出,信号和能量传导等多种生理功能,因此在药物靶点设计和生物探针开发等方面应用广泛。随着生物技术和生物医药的不断更新与发展,膜蛋白的研究越来越受到学者的重视,但是,膜蛋白的低丰度和难溶性是阻碍膜蛋白结构与功能研究的两大难题。本文以膜蛋白与超级折叠绿色荧光蛋白融合表达为基础,对11种大肠杆菌膜蛋白进行表达筛选;对筛选出表达量明显提高的重组膜蛋白进行小量表达优化及表达菌株大量培养;利用镍柱亲和层析和体积排阻色谱对重组膜蛋白进行纯化分析。在11个大肠杆菌膜蛋白表达筛选中,重组膜蛋白PLSohB的表达量最高。经表达优化实验后确定了PLSohB的最优表达条件:用TB液体培养基二次接种37℃培养3个小时后,加入终浓度为1m M/L的IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）,然后在30℃下诱导培养5个小时。用最优表达条件大量培养菌体,菌体经破碎和溶膜后纯化得到了样品纯度较高的蛋白样品。同时,PLSohB的体积排阻色谱图验证了膜蛋白Soh B主要存在形式为八聚体的推测。本实验通过融合表达对大肠杆菌膜蛋白进行了蛋白表达的快速筛选,克服了单一模式下膜蛋白表达量不理想的问题,更加便于后续纯化和结构分析,同时为膜蛋白表达提供了新的思路。