目的构建融合基因CTB-Emy162原核表达系统,纯化得到融合蛋白。建立多房棘球蚴亚单位疫苗CTB-Emy162的动物模型,观察亚单位疫苗CTB-Emy162免疫原性和抗原性。方法根据多房棘球蚴抗原Emy162在Gen Bank中的序列,用OptimumTM Codon软件优化Emy162,从而获得适合大肠杆菌BL-21表达的Emy162基因序列。PCR扩增Emy162基因,利用分子生物学技术与免疫佐剂霍乱毒素B亚基(CTB)相偶联。设计出一个科学合理的亚单位疫苗CTB-Emy162。构建CTB和Emy162双基因原核表达质粒p ET-28a-CTB-Emy162,将该质粒转化于E.coli BL-21(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达后,利用Ni-NTA柱亲和层析结合离子交换色谱法纯化后获得的蛋白。在获得蛋白CTB-Emy162基础上,建立实验组及对照组的动物模型:将纯化后的重组蛋白CTB-Emy162免疫SPF级BALB/c小鼠作为实验组,PBS免疫作为对照组。采用脾淋巴细胞增殖、ELISA等方法确证重组蛋白CTB-Emy162的免疫原性和特异性。结果成功构建重组蛋白CTB-Emy162的原核表达载体,并获得纯化后的重组蛋白CTB-Emy162。经脾淋巴细胞增殖实验、ELISA等分子生物学和免疫学方法证实CTB-Emy162有良好的免疫原性和抗原活性。结论经原核表达的多房棘球蚴亚单位疫苗CTB-Emy162具有良好抗原性和免疫效果,有可能为预防和治疗多房棘球蚴病提供新的疫苗。