姜黄素的提纯、稳定性及抗氧化性研究

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姜黄素是存在姜科属植物中的药食两用的天然药物,具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗癌、抑菌等多种生物活性,广泛应用于食品、饲料、化妆品等领域,在药品也具有较高的应用前景。本论文以干姜黄为原料,根据粒径对提取率影响,比较了水浴提取法、水浴搅拌提取法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法对姜黄中的姜黄素提取,选择水浴搅拌提取法提取姜黄中的姜黄素,利用大孔树脂和薄层色谱分别对姜黄素浓缩液进行分离纯化和精制,研究精制的姜黄素稳定性和抗氧化性能。本课题主要研究工作、内容和结论如下:(1)姜黄在不同粒径下,以姜黄素提取率为评价指标,分别采用水浴提取法、水浴搅拌提取法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法对姜黄中的姜黄素提取,得出水浴提取法在粒径20目时,提取率为65.86%;微波辅助提取法在粒径40目时,提取率为83.83%;超声波辅助提取法在粒径60目时,提取率为80.71%,水浴搅拌提取法粒径在60目之后,提取率基本不变,提取率为84.76%。四种提取方法中,采用水浴搅拌提取法时,粒径对姜黄素提取率影响较小,且提取率较高。(2)以姜黄素提取率为评价指标,在单因素的基础上,设计了三因素三水平响应面实验,对姜黄素水浴搅拌提取法的生产工艺进行研究,优化工艺条件。根据实验得出水浴搅拌提取法的最佳工艺条件为乙醇浓度72%,固液比1:16,提取时间91min,在此条件下,姜黄素提取率最高为85.79%。(3)以姜黄素的静态吸附率与静态解吸率差值为评价指标,对S-8、HPD-600、AB-8、XDA-7、HPD-100、D101-A六种树脂进行静态吸附和解吸,初步筛选出大孔树脂HPD-100、D101-A。采用静态吸附和静态解吸法,考察了HPD-100、D101-A静态吸附和解吸达到平衡时所需时间,得出D101-A达到平衡所需时间最短,确定其为最佳分离纯化树脂。以静态吸附考察了D101-A树脂吸附姜黄素的浓度为30mg/ml。采用动态解吸法,以姜黄素浓度为考察指标,分别用单一浓度和梯度浓度的乙醇作为洗脱剂,对吸附姜黄素的D101-A进行动态洗脱,确定最佳洗脱剂为95%乙醇。以不同流速对吸附姜黄素的D101-A进行研究,确定最佳洗脱流速为2BV/h。采用薄层色谱法,以比移值(Rf)为考察指标,确定最佳展开剂为氯仿-甲醇(10:1)。(4)采用动力学模型,探究了姜黄素在乙醇、pH、光照、温度条件下,浓度随时间的变化,乙醇溶液中符合二级动力学降解,在温度条件下,符合一级动力学降解,在光照培养箱中,符合零级动力学降解,在pH条件下,当pH≤7时,符合二级动力学降解,pH≥9时,符合一级动力学降解。姜黄素在较高浓度乙醇、酸性、低温、避光条件下较稳定,计算活化能分析了姜黄素在乙醇溶液中的稳定性,得出高浓度乙醇溶液中,姜黄素活化能高,比低浓度乙醇稳定,得到了姜黄素在乙醇溶液中降解的动力学模型。(5)采用Mnmolecular模型,以半清除率(IC50)为指标,研究了Vc、BHA、BHT、Curcumin对DPPH和ABTS自由基清除能力,通过模型得到的拟合方程计算各物质清除DPPH和ABTS自由基的IC50。结果表明,Vc、BHA、BHT、Curcumin清除DPPH自由基的IC50分别为5.113、11.678、15.813、7.735(ug/ml),Vc、BHA、BHT、Curcumin清除ABTS自由基的IC50分别为15.20、38.182、23.98、17.698(ug/ml),比较IC50可知姜黄素的抗氧化能力比Vc弱,比BHA、BHT强。
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