近年来因吸食氯胺酮(Ketamine,KET)后导致的驾驶肇事肇祸行为不断增多,如何进行系统化的检测已成为当前我国毒驾管控实施的难点。同时,血液检材因取样程序的复杂性限制了其在现场即时检测当中的应用。因此,课题以路面毒驾检测的现状为研究背景,提出以唾液检材替代血液检材用于路面毒驾管控的初步筛查工作中,并以此建立了系统化的毒驾管控方案。首先,研究建立了唾液KET及其代谢物去甲氯胺酮(Norketamine,NKET)的高效液色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,并将其作为确证的分析手段;其次,通过动物实验研究KET在唾液与血液中的代谢规律,同步对临床KET滥用者的血液及唾液进行定量分析,找出唾液KET、NKET浓度与血药代谢的关联性,探讨唾液作为检材的可行性;最后,在模拟路面毒驾检测的情境下,搭建并演练以唾液为检材,从初筛到认定的系统检测方案。论文的主要研究内容及结果如下:1.建立生物检材中KET及NKET的定性定量分析方法。通过优化唾液的前处理条件、色谱条件以及质谱条件,建立的检材中KET、NKET的高效液色谱串联质谱(LCMS/MS)检测法,并从定量线性范围,检出限,定量限,特异性,回收率,稳定性,临床样本验证等方面对所建立的方法进行验证。结果显示,KET、NKET的检出限均为0.01ng/m L,定量限均为0.10 ng/m L。KET的日内精密度分别为2.80%和2.80%,日间精密度分别为1.61%和1.09%,回收率为97.64%～100.30%,基质干扰为-1.80%～1.24%;NKET日内精密度分别是4.11%和1.40%,日间精密度分别是1.78%和1.04%,回收率为98.06%～100.58%,基质干扰为1.70%～3.54%。并对10例临床唾液样本进行检测。结果表明该方法灵敏度高、分析时间短、样品消耗低,适用于大批量样本的检验分析。2.建立KET的兔药代谢模型,同时收集并分析KET滥用患者的临床唾液及血液样本,分析唾液KET、NKET浓度与血药代谢的关联性,以探讨唾液检材替代血液检材的可行性。在24 h内雌兔KET、NKET的唾液药物浓度与血药浓度均具有良好的正向相关关系,但KET、NKET的唾液药物浓度与血药浓度的比值(S/P值)不同时间点的表现有较大差异;从临床样本研究中发现人体唾液KET、NKET与血药浓度的关联性与动物模型结论具有一定的相似性。首先,21例临床唾液样本中的KET、NKET浓度与血药浓度均具有很好的正向相关关系。其中,KET的Pearson相关系数为0.910;NKET的Pearson相关系数为0.868;但研究发现不同人群的S/P值变异系数较大。由于唾液中KET、NKET浓度与血药浓度具有良好的正向相关关系,唾液中的氯胺酮在一定程度上可以表征血液中氯胺酮。因此,唾液检材替代血液检材具有理论可行性。但由于S/P具体的数量关系难以确定,因而在采用唾液检材推断血药浓度时,还需谨慎考虑。3.研究模拟路边毒驾检测管控的需求,结合两种快速筛查方法,搭建并演练了两种唾液KET从初筛到实验室确认的检测方案。一种方案是胶体金法+LC-MS/MS法。该方案适用于需要当场获得检测结果的路面毒驾管控当中。执法人员使用胶体金法,对筛查结果为阳性的样品送检实验性进一步的检测验证;另一种方案是ELISA法+LCMS/MS法。该方案适用于以不漏检、尽可能排查所有潜在毒驾人员为前提的大批量路面样品筛查当中。执法人员将采集到的唾液样本送检实验室,实验室采用ELISA法对样本进行筛查,对于阳性可疑样本进行进一步的检测验证;两种方法均能够适用于毒驾认定的检测环节当中,能够有效地弥补当下我国毒驾管控系统中检测方案的空白。