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目的：创面愈合是一个复杂的生物学过程,是炎性细胞、修复细胞、细胞外基质及细胞因子等多因素共同参与并高度协调、相互调控的复杂过程。其中成纤维细胞在创面愈合中作用尤为重要。糖尿病患者皮肤易受损伤,损伤后创面愈合延迟或不愈合。文献报道高糖对大鼠皮肤成纤维细胞的增殖能力能明显起抑制作用。但具体机制不太明了。有研究表明,在体外Wnt信号通路的持续激活后,人成纤维细胞增殖能力增强。Wnt信号通路的激活能促进糖尿病溃疡的创面愈合,Wnt信号通路能促进皮肤创面愈合。既往的动物实验表明Wnt信号通路表达的增强能让糖尿病大鼠创面愈合加快。我们推测高糖可能通过Wnt信号通路来引起人成纤维细胞增殖减少,从而影响创面愈合的。而人成纤维细胞增殖能力与Wnt信号通路的关系未见报道,为了证实我们的推测,我们设计了本实验来研究高糖对人成纤维细胞增殖能力及Wnt信号通路的影响,并探讨人成纤维细胞增殖能力与Wnt信号通路的关系。方法：1人成纤维细胞的培养,每次弃去细胞培养瓶中的上清液,加入含有10%胎牛血清的高糖DMEM培养基4-5ml,放置于37℃、5%C02孵箱中培养。根据细胞生长情况1-2天换液一次,3-5天细胞铺满培养瓶底、亚融合后进行传代。在培养过程中对人成纤维细胞进行形态观测。分别以对照组(培养液中含25 mmolPL葡萄糖),高糖组：高糖组1(培养液中含40 mmolPL葡萄糖)高糖组2(培养液中含55 mmolPL葡萄糖)高糖组3(培养液中含70 mmolPL葡萄糖)高糖组4(培养液中含85 mmolPL葡萄糖)甘露醇组：采用同高糖等渗甘露醇甘露醇组1即40 mmolPL等渗甘露醇(培养液中含15mmolPL甘露醇)甘露醇组2即55 mmolPL等渗甘露醇(培养液中含30mmolPL甘露醇)甘露醇组3即70 mmolPL等渗甘露醇(培养液中含45mmolPL甘露醇)甘露醇组4即85 mmolPL等渗甘露醇(培养液中含60mmolPL甘露醇)作用于体外培养的人成纤维细胞,2通过MTT法检测不同处理因素在12h,24h,48h各个时间点下人成纤维细胞的增殖情况,3将在不同处理因素下人成纤维细胞中细胞总蛋白的提取出来后经过电泳,转膜,蛋白质的Western印迹杂交后,通过化学发光显影检测beta-catenin总蛋白的表达情况,结果用凝胶成像仪扫描进入电脑,用Quantity One 4.4.0软件分析,结果数值以目的蛋白与内参蛋白β-actin蛋白条带平均INT值的比值表示。结果：高糖可以抑制人成纤维细胞的增殖, MTT法检测到了高糖对人成纤维细胞的增殖的抑制,免疫印迹法检测到高糖对人成纤维细胞wnt/beta-catenin信号通路的抑制。结论：高糖对人成纤维细胞增殖的影响与Wnt信号通路相关。