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金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)是引起食物中毒的主要病原菌之一,同时也是引起奶牛乳房炎及多种临床化脓性感染的主要病原菌,其快速检测技术一直是研究热点。目前,国内检测金葡菌仍采用传统的方法,其操作繁琐,检测时间长,而且灵敏性、特异性均较低。本研究建立了快速检测乳品中金葡菌及其肠毒素的PCR方法,提高了检测方法的灵敏性,缩短了检测时间,为金葡菌引起的食源性疾病的快速检测诊断提供技术支持。本研究以金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)为靶基因,选择特异性引物,进行PCR扩增,检测乳品中的金黄色葡萄球菌。在此基础上,使用自行设计的简并引物SEAB检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、B, SEA与SEB的PCR产物长度分别为105bp和135bp。对其PCR扩增产物克隆后进行了DNA测序,得知与靶基因序列的同源性都高达99%,从而证实该产物为目的产物。使用简并引物SEAB检测SEA、SEB菌株DNA结果呈阳性,4株对照菌株的检测结果呈阴性,证实了该引物具有良好的特异性；SEB的检测下限为2.0×103cfu/ml, SEB的DNA最低检测浓度为3.58ng/μl。本研究还建立了快速检测乳品中常见致病菌沙门氏菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。结果显示,3对引物能同时特异地扩增出495bp、360bp和279bp的目的片段；对3株菌的检测限分别为1.9×102cfu/ml,2.0×102cfu/ml,2.9×102cfu/ml;3株菌DNA含量的最低检出限分别为3.86pg/μl,25.5pg/μl,3.47pg/μl。本研究使用nuc基因的引物及SEA、SEB的简并引物SEAB检测乳品的模拟试验与其它快速检测方法相比较,结果显示,使用PCR方法检出率为81.7%; Petrifilm RSA方法检出率为78.3%；国标法检出率为81.7%。在使用简并引物SEAB检测的50份生牛乳中有3份被检出含有SEA,有6份被检出含有SEB,有4份含有SEA和SEB,产毒素率为26.5%,肠毒素基因的检出率比较高。多重PCR检测生牛乳的模拟试验并与国标方法相比较,结果显示,两种方法的检出率分别为：46.7%、53.3%、50.0%。可知两种方法的检测结果完全一致,验证了M-PCR方法具有良好的可行性和实用性,显示出该方法具有较好的应用前景。