目的:通过实验,从动物实验角度证实中药硬膏对小鼠皮肤溃疡愈合的促进作用,为进行下一步的研究及并更好的应用于临床实践提供基础数据支持。方法:设计:采用随机对照形式的动物实验形式。材料SPF级小鼠30只,雌雄不拘,单体质量在20g至30g之间,购于河南省实验动物中心。中药硬膏(何氏膏药),主要药物成分为黄芪、当归、连翘、黄丹,由洛阳市第一中医院周围血管病科联合院制剂中心制备)、贝复新凝胶、MA240电子天平(上海市第二天平仪器厂制造)、OLYMPUS显微镜(OLYMPUS公司制造)。方法每只小鼠固定于解剖台,应用0.3%戊巴比妥钠注射液腹腔麻醉后,选取其项下背部皮肤,剔除其表皮毛发,使其皮肤暴露面积达3~4cm~2,以利于外用药物的固定,碘伏消毒后,以事先制作的面积为1cm~2的塑料薄片为参照,以手术刀切除其表层皮肤,充分止血后,再次碘伏消毒后暴露,每只小鼠个体单独饲养。造模成功后第2日开始给药,实验组小鼠溃疡面贴敷中药硬膏,硬膏面积略大于创面,约多出创周0.5cm,外用无菌纱布外敷固定,每4天,换药1次;阳性对照组小鼠创面经清洁后外涂贝复新,后以无菌纱布外敷固定,每2日给予换药1次;阴性对照组小鼠皮肤创面外敷生理盐水纱布并固定,每2日给予换药1次,三组同时进行,给药周期为12天。开始给药后当天及实验开始后第4、8、12天,使用透明塑料片覆盖溃疡面,并用笔划出溃疡边缘,随后沿边缘剪下塑料片,放于分度值为0.1mg的电子天平称重,同时根据1cm~2塑料片的重量,再将重量算出面积。开始给药后当天及实验开始后第4、8、12天,用1ml医用注射器对创面凹面内滴入灭菌生理盐水,直至液面与创面周围皮肤边缘相平为止,记录生理盐水滴入量,此即为溃疡容积。实验开始后第12天,再次用0.3%戊巴比妥钠注射液腹腔麻醉。手术刀片取溃疡面组织1块(厚度小于0.3cm),投入4%多聚甲醛固定,然后进行充分的冲洗、随后以低浓度到高浓度的酒精为脱水剂进行充分脱水,再将组织块置于透明剂二甲苯中进行透明、再将其置于已溶化的石蜡中并冷凝成块,然后置于切片机上进行连续切片(厚度控制在7微米),再进行常规脱蜡,苏木素伊红(HE)染色,流水彻底冲洗,再进行苏木素复染,然后给予脱水透明并进行封固,封片成功后镜下观察其各组溃疡面组织细胞成分情况不同并比较各组之间的差异,同时拍照摄片。染色完成后,阳性标记为浅黄色颗粒状,三组实验模型各留取观察切片3张,各个切片在显微镜下(200倍)各选取3个互相不重叠的视野。然后在整个观察过程结束后,统计各个小鼠的溃疡面积及容积,统计资料选用SPSS19.0进行方差分析。结果实验组和阳性对照组溃疡面在各个时间点的面积及容积均显著优于生理盐水对照组,而实验组在各个时间点的面积及容积又显著优于阳性对照组,各组溃疡面面积及溃疡容积在给药后的4d,8d,12d的差异显著,均有统计学意义(P<0.05),而中药硬膏组与贝复新组在各个时间节点的溃疡面面积及溃疡容积方面的差异亦较显著,有统计学意义(P<0.05)。