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随着人们对于细菌生物膜认识的逐渐深入,细菌生物膜所带来的利弊也越来越受到关注。致病菌生物膜的形成不仅会使致病菌变得难以清除,而且对于常用抗生素的耐药性有着惊人的提升,这无疑给食品加工及人们的生活造成了严重的威胁。因此,我们需要得到一种能够抑制或清除致病菌生物膜的天然产物以应对致病菌生物膜带来的危害。本论文首先通过微孔板结晶紫染色法研究了菌株Lactobacillus plantarum 12胞外多糖(Exopolysaccharides,EPS)对六种致病菌(Escherichia coli、Staphyloccocus aureus、Salmonella、Listeria monocytogenes、Vibrio Parahaemolyticus、Shigella flexneri)生物膜形成的抑制作用,结果显示L.plantarum 12 EPS对于六种致病菌生物膜形成均有不同程度的抑制效果,且对S.flexneri生物膜形成的抑制效果最佳,在2 mg/mL L.plantarum 12EPS的作用下抑制率达到53.77%,且L.plantarum 12 EPS对S.flexneri已形成的生物膜也具有清除作用,清除率最高可达61.2%;通过HT-29细胞模型研究了L.plantarum 12 EPS能够抑制S.flexneri在HT-29细胞表面的黏附,在1 mg/mL L.plantarum 12 EPS的作用下黏附抑制率达到57.1%。之后通过光学显微镜观察了L.plantarum 12 EPS抑制S.flexneri在玻片上的黏附及聚集。而且L.plantarum 12 EPS能够显著降低六种致病菌生物膜对于左氧氟沙星与环丙沙星的耐药性。进一步研究表明L.plantarum 12 EPS对六种致病菌菌体疏水性均有不同程度的影响,其中S.flexneri菌体疏水性下降了91.4%,且S.flexneri的疏水性随着EPS作用浓度升高而逐渐降低;在4 mg/mL L.plantarum 12 EPS的作用下,S.flexneri菌体的自聚性降低了30%;通过半固体琼脂扩散法发现L.plantarum 12 EPS对于有鞭毛致病菌E.coli的运动性有显著地抑制作用;通过吸光光度法测定发现L.plantarum 12 EPS能够抑制S.flexneri胞外多聚物基质中多糖的分泌量,而对于蛋白质及胞外DNA(e-DNA)的分泌量无显著影响。最后通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱将L.plantarum 12 EPS初步分离为EPS1与EPS2,并利用紫外光谱扫描确定EPS1及EPS2中均不含有核酸与蛋白,通过苯酚硫酸法测得二者的糖含量分别为84.7%与61.2%。再利用微孔板结晶紫染色法确定抑制S.flexneri生物膜形成的主要活性成分为EPS2。综上所述,L.plantarum 12 EPS能够抑制六种致病菌生物膜的形成,降低六种致病菌生物膜的抗生素耐药性。L.plantarum 12 EPS是通过抑制致病菌菌体的疏水性、自聚性、运动性以及影响胞外多聚物中胞外多糖的表达而抑制生物膜的形成。且L.plantarum12 EPS抑制致病菌生物膜形成的主要活性成分为EPS2。因此,L.plantarum 12 EPS有潜力成为一种应对致病菌生物膜威胁的天然产物。