背景秀山金银花产业发展迅速,种植面积已达30万亩,已给当地农民带来了经济效益,但目前基本以原生药材为终端产品,自我消化能力严重不足,市场附加值和抗风险能力极其低下。如何进一步拓展灰毡毛忍冬的经济价值,充分利用药材资源,增加药农的收入,成为当前急需解决的问题。本项研究基于金银花具有良好的清热泻火解毒的传统功效,和较强的抗菌、抗病毒、抗炎等现代药理作用,拟开发成为以金银花为主要原料的清咽含片。本研究受到国家科技支撑计划课题(2006BAC01A16)专项基金与重庆市“十一五”规划项目(秀山县政府资助)的大力支持。目的按照国家食品药品监督管理局发布的《保健食品注册管理办法》,研制中药复方制剂银铃含片,确定银铃含片的处方、制备工艺,制定银铃含片的质量标准,研究其抗炎的药效,并初步考察其安全性。方法1.制备工艺：根据处方中药物有效成分总黄酮和绿原酸的理化性质,选择水提醇沉法提取,并采用正交实验设计方法,以浸膏得率、总黄酮和绿原酸提取率为指标,优化提取工艺；根据提取物的性质,用单因素实验筛选适宜的辅料及用量；采用湿法制粒压片法制备银铃含片,以口感、崩解时限等指标进行综合考察评价,优化处方和工艺。2.质量标准：(1)鉴别：采用HPLC和TLC对处方中的秀山金银花进行定性鉴别。(2)检查：①溶出度,按《中国药典》2010年版二部附录xC第二法“桨法”测定：②水分,用快速水分测定仪对其水分含量进行测定：③其他：按照《中国药典》2010年版一部附录I制剂通则ID片剂项下的规定制定相关检查项目,包括崩解时限、重量差异和脆碎度等项目。(3)含量测定：采用HPLC和UV分别对银铃含片中的绿原酸和总黄酮的含量进行定量测定,确定其含量限度。3.稳定性考察：通过40±2℃的高温实验、92.5%的高湿度实验与4500±500Lx的强光照射实验,在40℃、75%的湿度下6个月的加速实验和在25℃、60%的湿度下36个月的长期实验考察银铃含片的稳定性。4.抗炎药效学研究：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和角叉菜胶致大鼠足肿胀实验,验证银铃含片对急性炎症的抗炎作用。5.安全性评价：采用急性毒性实验中的最大给药量法对小鼠一次性灌胃给药,计算其LDso;用金黄地鼠口腔黏膜刺激性实验考察其黏膜毒性,用长期毒性实验来考察其对大鼠的长期毒副作用,确定银铃含片的安全性。结果1.制备工艺：取处方量的秀山金银花粉碎成粗粉,加入A倍水,在℃下提取D次,每次Bh,合并提取液,滤过,滤液浓缩至相对浓度为1.1的清膏,加乙醇至含醇浓度达到75%,静置16h,减压回收乙醇,真空干燥,粉碎,过100目筛。加入适量的甘露醇、乳糖、EC、甜菊糖和薄荷醇,混匀,湿法制粒,在60℃下干燥45 min,整粒,加入硬脂酸镁,混匀,压片。2.质量标准：(1)鉴别：HPLC和TLC进行鉴别。(2)检查：①溶出度：含片中绿原酸溶出率>95%；②水分：银铃含片中水分含量<5%；③其他：符合《中国药典》2010年版一部附录制剂通则ID片剂项下的相关规定。(3)含量测定：银铃含片中每片的绿原酸和总黄酮的含量分别不得低于15mg和50mg。3.稳定性：通过银铃含片的影响因素强光照射试验,得出银铃含片在生产、包装、贮存时应注意避免强光长时间照射,应贮藏于通风阴凉干燥处。通过9个月的长期试验结果并参考加速试验的结果初步确定其有效期,暂定2年。4.抗炎的药效学作用研究：实验结果表明,预防性给药2周后,银铃含片可有效抑制急性炎症,银铃含片1.25、2.5、5.0 g·kg-1的3个剂量组对小鼠耳廓肿胀的抑制率分别为48.85%、54.48%、73.25%：对大鼠足趾肿胀6h内的最低抑制率为银铃含片2.5 g·kg-1组的5.3%,最高抑制率为银铃含片5.0 g·kg-1组的44.2%。证实,银铃含片对急性炎症有较好的抗炎作用。5.安全性考察：银铃含片急性毒性实验显示,其毒性很低,无法计算出LDso,因此按最大给药量20 g·kg-1的剂量对小鼠一次性灌胃,未见明显毒性症状,相当于临床用量的400倍。8.33 g·kg-1的银铃含片对金黄地鼠的口腔黏膜无明显刺激性作用,口黏膜病理检查无明显变化。银铃含片1.25、2.5、5.0 g·kg-1的3个剂量组对大鼠连续给药30天,大鼠的一般行为学指标,生理学指标,血液生化学指标,脏器系数指标及脏器病理检查均无明显变化,与空白组比较无显著性差异。结果显示银铃含片无明显毒副作用。结论本研究采用水提醇沉法对秀山金银花中主要有效成分进行提取,向其浸膏粉中加入乳糖等辅料,混匀,制粒,压片,分装,既得银铃含片。此处方及制备工艺合理、简单、可行。所制得的银铃含片质量稳定、可控,具有较强的抗炎作用,无明显的毒副反应。银铃含片应避免强光长时间照射,有效期暂定2年。