目的 人脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，占颅内肿瘤的35—60％。因为病因不明，无法进行干预，临床疗效差，预后不佳，尤其是儿童胶质瘤。因此，目前脑胶质瘤的治疗仍是一个世界性的难题。自本世纪初，美国学者Rous发现了世界上第一个肿瘤病毒(Rous sarcoma virus,RSV)后，就将病毒与肿瘤的发生联系起来。猴病毒40(simian virus 40,SV40)为双股环状DNA病毒，是1960年在用猴肾细胞培养制备脊髓灰质炎病毒疫苗过程中发现的。SV40与多瘤病毒BKV和JCV的嗜神经性和实验动物致瘤的潜在能力，一直被认为是脑肿瘤发郑州大学2002年硕士学位论文SV40感染与人脑胶质瘤发生的相关性研究病的可能辅固子。有研究表明：SV4 0在体外可以使人和动物的正常细胞发生恶性转化，对仓鼠高度致瘤，主要可诱发室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤、髓母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤和间皮瘤等特殊肿瘤类型；SV40致瘤性和转化能力严涨赖于病毒基固组早期区域的表达，编码产物大T抗原（瞰 TumorTigen，T《g ）b具有多种生物和生化特性的核磷蛋白，分子量％，000；它具有HP酶和解旋酶活性，可结合病毒或细胞洲A，诱导其复制，并能与肿瘤抑制基因 PS 3等形成复合物，导致 P53活性丧失，干扰细胞周期正常的负性调节。SV40T、g是SV4 0病毒最主要的病毒转化蛋白，它的表达可改变宿主细胞基因组的完整性和稳定性，诱发染色体数目异常和结构的畸变。已发现约有15％的人类肿瘤的发生与SV40感染有关、近年来，采用PCR方法已在人脑室管膜瘤组织中已检测到SV40 DNA序列。本研究旨在探讨 SV4 0感染与人脑龈瘤发生的相关性。 方法采用聚合酿反压…olvmerase chain reaction，PCR）、斑点杂K（Dot blot）、原位杂X门n situ hybrid。ation，ISH）技术及免疫组织化学uBC法）检测2 0名正常人脑组织，9 7例人脑胶质瘤组织和人脑胶质瘤 BT325细胞株中 SV40 DNA序外并对 SV4 0 DNA阳性的胶质瘤组织，进一步采用免疫共沉淀和 2郑州大学2002年硕士学位论文S＊40感染与人脑胶质瘤发生的相关性研究Western blot杂叉万法检测 SV4 0 T－吗的表达及 Tug－rim复合物的存在。 结果 门）N＄人脑组织中 PmSV40DNA胆性率为V”（5％）。人脑胶质瘤组织中P CRCRSWo DNADNAP日性率为46／97 47．4们，BT325胶质瘤细胞株中也检测出SV40的DM序列。胶质瘤组 SV40 DNA阳性畅著高于正常人脑组织对照组b叩．01厂且不同病理级别的雕瘤组织中PCR IV40DNA！日性率存在p著差异 （＜0 01儿 （）经蛐位杂交检测，在PChl阳性的 4 6例人脑龈瘤组织中，原位杂交阳性 43例，1例PCR阳性的正肽脑组织和B批5）tiM 瘤细胞株ISH SV叨DNA均阳性。ISH结果显示SV40 DNA定位于胶翩细胞核内，呈弥漫或片灶状分布。（列9丁例人脑赈瘤组织中＊g表达阳性 3 8例，F日性率3 7．1巩 HTing表达水平与鹏瘤临颇理级别呈显粗相关（Pearson列联系数－fi71，P＜0。01）。在38例T亿g表达阳性的胶质瘤组织中，经免疫共沉淀和Western＊ot均友现T－昭与N3形成特异性复合物的存在。 结论 门）人脑胶质瘤组织中存在 SV4 0 MA，提示潜在性的SV4O感染与人脑胶质瘤挝有密切相关性；uBV40MA在人脑胶质瘤纽织中定位于细胞核，报弥跟片灶状分布。门） 3郑州大学2002年硕士学位论文SV40感染与人脑胶质瘤发生的相关性研究在人脑胶质瘤组织中存在 SV40 T响g的阳性表达，表明了Tug．是 SV4 0引起人脑胶质瘤发生的重要因素ZH）SV40 Tdg与PS 3可形成特异性复合物，T、g－．P53特异性复合物的形成，导致了 PS 3活性的丧失，使细胞周期控制失去了正常的负性调节。揭示了 SV40弓起的P53基因失活可能是SV40弓起人脑雕瘤发生的一个重要机理。