LED红光对高脂血症大鼠血脂的影响及其机制探讨

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目的:心脑血管疾病已经成为危害人类健康的主要疾病之一,居于我国死亡原因的首位。心脑血管疾病的发生与脂代谢异常密切相关,适当的调脂治疗能够显著改善心脑血管疾病的预后,如何安全有效的调节血脂成为临床研究的热点。目前,调脂的方法主要包括两大类:非药物治疗和药物治疗。非药物治疗主要是通过改变生活方式(低脂饮食、运动锻炼、减肥、戒烟)来调节血脂,适用于轻度血脂异常患者,当非药物治疗3-6个月不能奏效的时候,需要应用药物来调节血脂。目前国内外常用的有5类:他汀类、贝特类、烟酸类、树脂类(胆酸螯合剂)和胆固醇吸收抑制剂。临床上以他汀类和贝特类较为常用,然而随着药物剂量的增加,其不良反应如转氨酶升高,肌痛及横纹肌溶解等发生率也显著上升。近年来物理治疗以其安全确切的疗效在临床中得到广泛应用,其在血脂领域的研究和应用也备受关注。研究表明低强度激光照射疗可以降低血脂含量[1],改善血液流变学[2]。LED红光与低强度激光的波长范围相似,且具有功耗低,易集成等特点[3],我科小样本初步临床试验显示LED红光在调节血脂方面有一定的作用。为此,我们在成功建立大鼠高脂血症模型的基础上,用LED红光治疗仪(波长630nm±15nm,亮度≥8000cd/m2)照射大鼠腹部,测定大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量及血浆LPL、HP的活性,肝脏病理切片HE染色、肝脏HMG-CoA还原酶免疫组化染色,观察LED红光对高脂血症大鼠血脂、肝脏病理学改变和HMG-CoA还原酶表达的影响。方法:36只雄性SD大鼠,8周龄,体重218-287g,随机分为正常对照组(12只)和高脂模型组(24只)。正常对照组喂饲普通饲料,高脂模型组喂饲高脂饲料,连续喂养6周。大鼠禁食12小时,内眦静脉丛采血,测定血清TC、TG的含量,高脂模型组大鼠血清TC、TG的含量高于正常对照组,差异有统计学意义,即为造模成功。随后,将高脂模型组大鼠随机分为高脂对照组和LED治疗组,LED治疗组给予LED红光照射每天30分钟,高脂对照组不给予照射,连续28天,照射期间各组喂养饲料不变。分别于照射的第14天、第28天,大鼠禁食过夜,次日内眦静脉丛采血,测定大鼠血浆中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量。于照射第28天取血后大鼠尾静脉注射肝素130u/kg,测定LPL、HL的活性。之后处死大鼠,称大鼠肝脏湿重,取肝右叶中部小块组织,4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋、切片、HE染色,HMG-CoA还原酶免疫组化染色,光镜下观察肝脏病理改变及肝脏HMG-CoA还原酶的表达。结果:1.高脂饮食对大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C的影响:经过6周的高脂饲料喂养,与正常对照组比较,高脂模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量明显升高,差异有统计学意义(P﹤0.01),说明高脂模型造模成功。2.LED红光对高脂血症大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的影响:LED照射前,LED治疗组与高脂对照组相比,血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量均无明显差异。LED照射14天后,LED治疗组与高脂对照组相比,血清TC、TG、LDL-C的含量降低,HDL-C的含量升高,但只有LDL-C有统计学意义(P﹤0.05)。LED照射28天后,LED治疗组与高脂对照组相比,血清TC、TG、LDL-C的含量降低,HDL-C的含量升高,差异有统计学意义(P﹤0.01)。3. LED红光对高脂血症大鼠血浆LPL、HL活性的影响:LED红光照射28天后,LED治疗组大鼠血浆LPL、HL的活性高于高脂对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。4. LED红光对大鼠体重、肝重、肝指数的影响:实验结束时,LED治疗组与高脂对照组相比,其肝重、肝指数都明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LED治疗组大鼠体重与高脂对照组相比,也有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。5.大鼠肝脏病理改变:肉眼观察:正常对照组肝脏呈红褐色,质地中等,包膜光滑,边缘锐利,切面光洁。高脂对照组肝脏呈黄白色,质地偏硬,包膜紧张,边缘圆钝,切面油腻。LED治疗组肝脏色泽、质地较高脂对照组有不同程度的改善。光镜观察:正常对照组肝小叶结构清晰,肝细胞排列整齐,细胞核形态正常,胞浆均匀;高脂对照组肝细胞胞浆内充满大小不等的脂肪滴,细胞核多被挤向一边,肝细胞排列紊乱;LED治疗组脂肪空泡的数量与高脂对照组相比明显减少,细胞核基本居于细胞的中央,肝细胞排列较高脂对照组有序。6.肝脏HMG-CoA还原酶的表达:HMG-CoA还原酶阳性部位在肝细胞胞浆内,呈棕黄色。正常对照组大鼠肝脏中央静脉及汇管区周围可见散在分布的阳性细胞,免疫组化评分(1.9±0.99),高脂对照组大鼠肝脏中央静脉及汇管区周围可见较多阳性细胞,免疫组化评分(3.8±1.99)显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。LED治疗组大鼠肝脏可见少量阳性细胞,与高脂对照组相比,阳性细胞的个数明显降低,免疫组化评分(2.1±1.29)低于高脂对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.本研究采用高脂饮食诱导法,成功复制了大鼠高脂血症模型。2.LED红光能够降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量,升高血清HDL-C的含量。3.LED红光能够增加高脂血症大鼠血浆LPL和HL活性。4.LED红光能够降低高脂血症大鼠的肝重及肝指数。5.LED红光能够减轻高脂血症大鼠肝脏脂肪变性。6.LED红光能够减少肝细胞HMG-CoA还原酶的表达。
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