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目的通过磁共振波谱技术(MRS)精确定位、定量检测二甲基亚砜浓度的方法进行可行性研究,获取二甲基亚砜(DMSO)浓度和对应MRS波谱峰下面积的关系,为MRS检测复合组织中DMSO浓度的研究奠定方法学基础。方法1、a.实验分组:对照组、实验组和校正组,对照组为不含DMSO的0.9%生理盐水溶液,实验组为2%v/v、6%v/v、10%v/v、14%v/v、18%v/v、22%v/v、26%v/v的等浓度梯度DMSO溶液,校正组为4%v/v、8%v/v、12%v/v……28%v/v的等浓度梯度DMSO溶液,每个浓度的DMSO溶液留取4个样本。b.样品滴定:在室温(20~24℃)、溶液37℃~38℃、标准大气压的条件下,进行体外外标准建立实验,于实验室通风橱内使用100-1000ul移液枪、15ml螺口尖底离心管、99.5%DMSO原液、0.9%氯化钠溶液、8ml试剂盒(4×7格)酒精灯旁逐组配制并标记。c.MRS检测:将配制完毕的样本密闭保存完好,逐个经BRUKER 7T磁共振成像仪扫描;获取结构像后,将感兴趣区(region of interest,ROI)定位在溶液立体结构的上下1/3、前后1/3、左右1/3的区域内,并进行匀场;匀场完毕后于ROI处行磁共振波谱检测,获取与目标溶液对应的原始波谱,经基线校正、相位校正、参数拟合等处理后,获取标准波谱。d.峰面积测量:在标准谱线上测量二甲基亚砜对应波峰的“峰高”及“半高线宽”,计算出该波峰对应的峰下面积。e.回归曲线分析:将各组数据经SPSS18.0软件统计分析后,得出不同浓度DMSO组样本对应的波谱峰下面积,经EXCEL软件绘制成散点图并进行回归分析,得出DMSO浓度和峰下面积的回归关系,为动物实验测得特定部位保护剂浓度奠定方法学基础。2、取健康新西兰成年大白兔3只,体重(2.0±0.2)kg,雌雄不限。于膝近端3-5cm处离断大腿游离并保护好股血管,将静脉套管针置入股动脉远端,2-0丝线捆扎固定后于置管近端离断血管。将生理盐水和预配置好的20%v/vDMSO溶液各依次灌注于3只兔离断后肢。灌注完毕后的兔后肢置于于磁共振成像仪内,检测平面选择在膝下2~3cm处的区域内,依次将感兴趣区定位于肌肉组织、皮下组织处行波谱检测。读取波谱峰下面积,通过实验一获得的回归关系,可获得灌注肢体对应组织部位的DMSO浓度。结果实验一:生理盐水组在2.62ppm附近均未检测到对应的波峰,峰下面积为“0”;2%v/v、6%v/v、10%v/v、14%v/v、18%v/v、22%v/v、26%v/v组的二甲基亚砜溶液通过~1H-MRS检测均能在2.62ppm附近出现对应的DMSO波峰,峰下面积平均值分别为(278.53±4.62)×10~3、(950.20±23.60)×10~3、(1481.34±21.79)×10~3、(2239.33±50.33)×10~3、(2794.35±208.12)×10~3、(3453.18±90.81)×10~3、(4130.58±295.30)×10~3。得到的回归方程为I=(15871·C-28.32)×10~3,可信度为0.9992。实验二:生理盐水组经MRS检测后波谱的2.62ppm位置无明显干扰波峰出现。20%v/v组皮下和肌肉组织的DMSO峰下面积对应的浓度为12.94%v/v、11.81%v/v。结论1、在一定条件下,MRS用于兔离断后肢的冷冻保护剂浓度检测可行,二甲基亚砜的浓度和波谱峰下面积具有高度线性相关性。2、使用磁共振波谱技术可无创、精确、多点、定量检测复合组织中二甲基亚砜的局部浓度。