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针对水产养殖中违禁使用孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)引起的食品安全隐患,本论文研究建立了两种基于抗原抗体特异性识别的同时检测孔雀石绿和结晶紫残留的免疫分析新方法,并用于水产品中孔雀石绿和结晶紫的同时快速定量检测。荧光猝灭免疫亲和凝胶检测柱(FQ-ITC)是基于从荧光供体(量子点)到荧光受体(MG或CV)的荧光共振能量转移以及分析物与其多克隆抗体之间的特异性结合而建立的。在优化FQ-ITC的制备条件,检测条件基础上,建立了FQ-ITC检测方法,并对方法的特异性进行了分析。进一步分析了水产品的样品基质效应并优化建立了样品前处理方法和基质消除方法,建立的FQ-ITC可以成功应用于草鱼、鲈鱼、鲤鱼和虾等水产品中MG或CV残留的同时快速检测,该过程可在10 min内完成,并可通过目视判断结果,可视化检测限为2 μg/kg。荧光标记磁分离竞争免疫分析方法(FI-MSI)利用分析物和感应探针与信号探针竞争性结合,通过反应体系荧光强度变化对孔雀石绿和结晶紫进行快速检测。信号探针和感应探针经活化酯法制得,MG和CV标准品和信号探针的添加量均为10 μL,感应探针的添加量为30 μL,反应体系总体积为200 μL,孵育时间为70 min。荧光标记磁分离免疫分析方法的检测限为0.012 μg/L,线性范围为0.1-1000 μg/L。选择与分析物结构类似的隐性孔雀石绿(LMG)和隐性结晶紫(LCV)物以及水产品中常见的七种药物进行交叉实验,结果显示该分析方法特异性良好。在优化建立样品前处理方法和基质消除方法基础上,该分析方法可用于草鱼、鲈鱼、鲤鱼和虾四种水产品的定量分析。样品检出限为0.029μg/kg,添加回收率MG的回收率为80.0%-98.4%,CV的回收率为80.0%-102.0%。所建立的两种方法分别与液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)和商业ELISA试剂盒方法进行比较,验证了所建立分析方法的有效性。两种免疫新方法均可应用于水产品中孔雀石绿及结晶紫的快速同时检测。