磁性复合微球的制备及其在蛋白吸附中的应用

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本文通过共沉淀法制得了Fe3O4磁性纳米颗粒,进而用一定量的油酸对Fe3O4纳米颗粒表面进行改性,得到了亲油性的磁流体。分别采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、X射线衍射(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、振动样品磁力计(VSM)分析了改性Fe3O4纳米颗粒的结构、粒径及粒径分布、形态和磁性能。所得结果表明:改性后Fe3O4纳米颗粒表面带有油酸,粒径分布在10-15nm之间,呈超顺磁性。以十二烷基硫酸钠(SDS)为乳化剂,二乙烯基苯(DVB)作为交联剂,在亲油性磁流体存在的条件下,采用细乳液聚合法分别使单体甲基丙烯酸甲酯(MMA)与甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)、苯乙烯(St)与2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸(AMPS)聚合,制得了PMMA-co-PGMA和PSt-co-PAMPS磁性复合微球,并进一步对PMMA-co-PGMA磁性微球进行表面改性,制得了表面带氨基的PMMA-co-PGMA-NH2磁性复合微球,由线性电位滴定法测得微球表面氨基含量为431μmol/g。并用FTIR、TEM、热失重(TG)和VSM对两种磁性复合微球的结构、形态和尺寸、磁含量以及磁性能进行了表征,结果显示PSt-co-PAMPS和PMMA-co-PGMA磁性复合微球的粒径分布均匀,平均粒径均为170nm,PMMA-co-PGMA复合微球的磁含量可以控制在20%-50%之间。利用疏水和静电作用,制得的PSt-co-PAMPS磁性微球可以物理吸附蛋白质;经过戊二醛修饰后,PMMA-co-PGMA-NH2磁性微球表面带上醛基,可共价连接蛋白质。将两种微球应用在牛血清蛋白(BSA)的吸附中,结果证明,比起PSt-co-PAMPS微球的物理吸附,采用化学吸附的PMMA-co-PGMA-CHO微球有更大的吸附量,能更快的达到吸附平衡,并且对BSA的结构影响更小,在蛋白吸附中更有优势。进而研究了PMMA-co-PGMA-CHO磁性复合微球固定化木瓜蛋白酶。相比自由酶,制得的固定化酶有更好的温度和pH适应性,而且能保存较长时间。
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