【摘 要】
:
南方根结线虫病作为一种典型的土传病害,对全世界的农业生产造成了巨大的经济损失,研究南方根结线虫与植物寄主的互作机制,对防治南方根结线虫病的发生具有重要的指导意义。光作为植物生长发育重要的环境因素,能够影响病原物在植物体内的侵染和发育。本文通过实时荧光定量PCR(q PCR)、绿色荧光蛋白标记目的基因和突变体表型验证等试验证明植物光信号相关基因和其下游的转录因子HY5在南方根结线虫在寄主体内侵染和发
论文部分内容阅读
南方根结线虫病作为一种典型的土传病害,对全世界的农业生产造成了巨大的经济损失,研究南方根结线虫与植物寄主的互作机制,对防治南方根结线虫病的发生具有重要的指导意义。光作为植物生长发育重要的环境因素,能够影响病原物在植物体内的侵染和发育。本文通过实时荧光定量PCR(q PCR)、绿色荧光蛋白标记目的基因和突变体表型验证等试验证明植物光信号相关基因和其下游的转录因子HY5在南方根结线虫在寄主体内侵染和发育过程中发挥一定作用,并且利用染色质免疫共沉淀(Ch IP)技术验证了HY5可与糖转运蛋白家族部分基因的启动子结合。取得了以下的研究结果:1.HY5对南方根结线虫侵染和发育的影响:HY5是光信号传导途径中核心转录因子。接种南方根结线虫后HY5基因在拟南芥叶片中表达量为1 dpi与对照组差异不显著,15dpi显著上调,在根系中表现为1 dpi显著下调,15 dpi与对照组差异不显著。同时在拟南芥hy5突变体接种南方根结线虫试验中,hy5突变体中根结数、线虫总数均低于野生型,接种18天后幼虫占线虫总数的比例高于野生型。HY5融合GFP结果显示,在根结附近荧光信号明显高于其他部位。2.不同波长的光对南方根结线虫侵染和发育的影响:HY5是位于光受体下游的转录因子,光受体能够正向调控HY5的表达。其中光敏色素PHYA、PHYB在接收红光信号中发挥着主要的作用,在拟南芥phya、phyb、phya/b突变体接种南方根结线虫试验中,拟南芥phya和phya/b突变体中根结数、线虫总数低于野生型,幼虫占线虫总数的比例高于野生型,拟南芥phyb突变体中根结数低于野生型。同时用南方根结线虫接种在红光和黑暗两种条件下生长的拟南芥,试验结果表明红光处理条件下的根结数量以及线虫数量高于黑暗处理。隐花色素CRY1、CRY2以及向光素PHOT1、PHOT2在接收蓝光信号中发挥着主要的作用,在拟南芥cry1/2、phot1/2和cry1/2 phot1/2突变体接种南方根结线虫试验中,拟南芥cry1/2和cry1/2 phot1/2突变体中根结数、线虫总数均低于野生型,幼虫占线虫总数的比例高于野生型,拟南芥phot1/2突变体中根结数以及线虫总数低于野生型。同时用南方根结线虫接种在蓝光和黑暗两种条件下生长的拟南芥,试验结果表明蓝光处理条件下的根结数量以及线虫数量高于黑暗处理。检测发现南方根结线虫接种拟南芥和水稻后光受体基因在叶片组织以及根组织中均发生不同程度的变化。因此,不同波长的光能够影响南方根结线虫在寄主体内的侵染和发育。3.SWEET糖转运蛋白对南方根结线虫侵染和发育的影响:HY5能够调控植物体内多种基因的转录,糖作为线虫生长发育的营养物质,SWEET糖转运蛋白基因在运输糖分的过程中起到了重要作用。在拟南芥sweet11、sweet12、sweet15、sweet11a/12b/15d突变体接种南方根结线虫试验中,拟南芥sweet12b、sweet15d、sweet11a/12b/15d突变体中根结数、线虫总数低于野生型。同时检测发现南方根结线虫接种拟南芥后,SWEET糖转运蛋白基因表达量在根组织中发生不同程度的变化。通过染色质免疫共沉淀(Ch IP)技术验证了转录因子HY5能够与SWEET11、SWEET12、SWEET15三种糖转运蛋白基因启动子中的顺式元件结合。其中SWEET11启动子中G-BOX(CACGTG)和ACE-BOX(ACGT)两种顺式元件能够与转录因子HY5结合,SWEET12启动子中ACE-BOX(ACGT)顺式元件能够与转录因子HY5结合,SWEET15启动子中G-BOX(CACGTG)和ACE-BOX(ACGT)两种顺式元件能够与转录因子HY5结合。
其他文献
环总科线虫是一类具有环型食道、根外寄生(少数为半内寄生)植物寄生性线虫,其寄主范围特别广泛,主要生活在农作物与木本植物根系周围。环线虫利用其强壮的口针,对寄主植物根系造成一定程度损伤,为其他病原微生物提供了侵染位点,对植物造成复合型侵染,从而产生一定的经济损害。环总科线虫传统分科属主要依据线虫表皮特征进行分类,随着分子鉴定方法的介入使其分类系统变得更为复杂。与此同时我国环总科线虫种类鉴定还有很大的
近年来国家在政策颁布与实施过程中以耕地数量质量与生态全面协调发展为根本要求,逐渐从追求耕地产量为主向数量、质量、生态“三位一体”的目标推进。农户是耕地保护的重要主体,在耕地保护政策实施过程中发挥重要作用。追溯目前农村耕地保护政策的实施情况效果并不理想的原因,主要归咎于农户对耕地保护政策的支持度不够。表现为农户耕地保护政策的认知程度有偏差、耕地保护的意愿不强烈等问题。可见探明影响农户对耕地保护政策支
烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)目前在农业生产中分布较广较常见,对包括烟草在内的许多经济作物带来极大危害,尚缺乏低毒且环境友好的防控药剂。以往采用的化学防治策略对环境和人体健康等具有很大的潜在威胁。本研究在辽宁、四川、山西、内蒙古四个地区采集收集78份土样,采用稀释分离法,将土壤中的微生物分离,筛出土壤单菌落,选用PDA培养基,LB培养基和NA培养基。初步利用平板对
铁岭市是辽宁省主要烟草种植区,烟农长期不合理施肥导致土壤结构破坏,有机质含量下降,影响烟叶产量与品质。本研究采用田间小区试验方法,系统研究了不同微生物肥料用量配施不同烟草复合肥用量对该地区植烟土壤、烟株生长发育、品质的影响,以期减少化学氮肥用量,提高烟叶产质量,找出微生物肥料配施化肥对植烟土壤营养效应与烟草生长指标、产量及品质的影响,为该地区合理植烟提供理论依据。设置田间常规施肥量基础上烟草复合肥
丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)可与绝大多数的陆生植物形成菌根共生体协助宿主植物进行养分吸收,还可以稳定土壤结构、增强宿主植物的抗逆性和抗病虫害能力。农田生态系统中菌根共生体的形成及AMF的生长发育受农田土壤生态环境的影响,不同的土壤类型、宿主作物、肥料种类及施用量均会改变AMF群落结构。生物炭作为土壤改良剂可以改善土壤养分条件和土壤结构,施用生物炭
近年来,甜瓜(Cucumis melo L.)种植逐渐设施化,生产走向规模化,加剧了甜瓜连作障碍的发生。采用抗病砧木嫁接甜瓜可以提高植株在不良环境下的耐受性,克服连作障碍,但其作用机理有待深入研究。本文研究了抗病南瓜砧木嫁接对甜瓜植株生长发育及甜瓜枯萎病抗病性的影响;分析了植株根系分泌物的化感作用;测定和比较了植株根系分泌物组分和相对含量的差异性,在此基础上通过模拟探究关键活性物质的化感作用;阐明
水稻纹枯病是水稻三大病害之一,严重为害水稻产量及品质。水稻纹枯病菌致病机制及其与寄主植物的互作机制十分复杂,在植物与微生物的互作过程中,效应蛋白的作用尤为重要。本文主要研究水稻纹枯病致病菌中的立枯丝核菌(Rhizocatonia solani)。目前,对于水稻纹枯病菌效应蛋白的鉴定及功能分析的研究逐渐深入,因此构建一个水稻纹枯病菌分泌蛋白库对完善效应蛋白的研究具有非常重要的意义。本研究根据水稻纹枯
花生疮痂病菌(Elsino(?)arachidis)可产生一种具有光敏活性的苝醌类真菌毒素—痂囊腔菌素(Elsinchrome,ESC),光照条件下通过产生过氧化氢(H2O2)和高毒性的单线态氧(~1O2)引起寄主细胞氧化损伤和脂质过氧化,具有强烈的细胞毒性,ESC的积累量与致病性呈显著性正相关,是病菌重要的毒力因子,在病菌侵染和致病过程中发挥关键作用。基于E.arachidis全基因组测序筛选到
水稻是我国重要的经济作物之一,由稻梨孢(Pyricularia oryzae)导致的稻瘟病是威胁水稻生产的第一病害。对稻瘟病菌的生理小种与无毒基因进行研究并筛选水稻抗病种质资源是水稻抗病育种的基础。本研究对辽宁省各地区稻瘟病菌进行生理小种和无毒基因型鉴定,对无毒基因进行了测序与序列比对,对无毒基因Avr-Pi9进行了生物信息学分析,并对辽宁省水稻品种(系)的抗瘟性进行了鉴定和评价。研究成果可为辽宁
花生疮痂病(Elsino?arachidis)是我国花生产区重要的真菌病害,产生光敏性真菌毒素痂囊腔菌素(Elsinochrome,ESC),具有强烈的细胞毒性,为重要的毒力因子。前期研究发现,ESC生物合成极显著地受到光照调控,揭示病菌毒素生物合成的光调控作用及其分子机制,对探究该病菌的侵染过程、致病机制和调控网络具有重要意义,可为病害防治策略的高效制定提供了科学理论支撑。本文开展了光质对病菌生