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目的本课题在中医学理论指导下,采用现代实验学技术,从不同角度研究“益气活血方”对兔佐剂性关节炎动物模型的影响,了解益气活血方治疗类风湿关节炎的药理效应及作用机制,希望能为临床应用提供理论基础。方法将40只新西兰兔随机分为正常组、模型组、益气活血方组、雷公藤多苷组。对实验兔进行3周的连续灌胃,测量造模前、治疗前、治疗3周兔致炎侧足趾周径、体重变化;采集兔耳缘静脉血,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定血清中白细胞介素17(interleukin 17,IL-17),白细胞介素23(IL-23)水平;疗程结束后耳缘静脉空气栓塞处死,取实验兔患侧膝关节组织进行苏木精-伊红染色(hemotoxylin and eosin staining,HE),观察关节软骨组织病理学变化情况;收集关节腔内关节液,ELISA法检测关节液中IL-10,基质金属蛋白酶1(Matrix metal loproteinase-1,MMP-1)水平;取滑膜组织,实时荧光定量PCR(聚合酶链式反应)方法测量滑膜细胞凋亡基因Bax m RNA,Bcl-2 m RNA水平。结果1.益气活血方对AA兔一般情况影响:造模前,各组兔体重及足趾周长无显著差异(P>0.05)。治疗3周后,益气活血方组体重较模型组较雷公藤组与模型组均显著升高(P<0.05),而与正常组比无显著差异(P>0.05);与模型组相比,益气活血方组足趾周长显著下降(P<0.01);与雷公藤多苷组比较,益气活血方组下降显著,差异具有统计学意义(P<0.01);2.ELISA检测结果显示:与模型组相比,益气活血方组及雷公藤多苷组IL-17、IL-23显著降低(P<0.01);益气活血方组与雷公藤组多苷组比较IL-17、IL-23水平下降明显(P<0.05);与模型组比较,益气活血方组及雷公藤多苷组关节液中IL-10水平均显著升高(P<0.01);益气活血方组与雷公藤多苷组比较无明显差异(P>0.05)。与模型组比较,益气活血方组及雷公藤多苷组MMP-1均明显下降(P<0.01);与雷公藤多苷组比较,益气活血方组MMP-1水平显著下降(P<0.01)。3.HE染色结果显示:正常组关节间隙清晰,软骨细胞呈串珠样排列整齐;与模型组比较,益气活血方组与雷公藤多苷组关节软骨细胞破坏呈不同程度缓解,软骨细胞排列趋于正常,水肿程度减轻。4.PCR检测结果显示:治疗3周后,益气活血方组Bax m RNA显著高于模型组(P<0.01),与雷公藤多苷组水平相当(P>0.05)。益气活血方组Bcl-2 m RNA含量明显低于模型组(P<0.01);与雷公藤多苷组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.益气活血方对RA模型兔具有较好的抗炎消肿作用。2.益气活血方能够抑制血清中炎性细胞因子IL-17、IL-23的释放,控制炎症反应。3.益气活血方能够下调关节液中MMP-1水平减少对骨质的降解,上调抑制性炎症因子IL-10的水平来改善关节炎症反应,阻止RA进程。4.益气活血方能够调控细胞凋亡(Bcl-2/Bax)水平,通过降低Bcl-2/Bax比,促进滑膜细胞凋亡,抑制骨破坏。