中药及天然植物中存在着众多的生物活性物质,是抗肿瘤新药筛选的重要资源。本文以藤苦参和半枝莲为对象,探讨了所含化合物的抗肿瘤活性及其作用机制,并以效应成分为对象,建立了半枝莲药材及其有效部位质量控制方法。 采用MTT法,对藤苦参中分离得到的9个单体化合物进行抗肿瘤活性测定,结果显示,9个单体化合物都具有明显的抗肿瘤活性,其中新化合物藤苦参素对多种人肿瘤细胞有较强的体外增殖抑制作用。采用AO/EB双染法和流式细胞术,初步探讨了藤苦参素对PC-3人前列腺癌细胞的凋亡作用,发现其抗肿瘤作用机制与诱导细胞凋亡有关。 采用计活细胞数法和MTT法,对半枝莲5种溶剂萃取部位进行体外抗肿瘤活性筛选,结果二氯甲烷和乙酸乙酯部位具有抗肿瘤活性。进一步化学分析显示,这两个部位含有大量黄酮类成分,并从中分离得到6个黄酮单体。两部位分离所得化合物活性的分析显示,半枝莲所含黄酮类成分具有抗肿瘤活性,其中芹菜素、木犀草素和山萘酚活性最强,初步推断黄酮类为半枝莲抗肿瘤作用有效部位。 采用高效液相色谱法,建立了半枝莲药材指纹图谱分析方法,并应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对指纹图谱进行相似度评价。不同产地半枝莲药材共标出12个共有峰,其中8批药材相似度在0.90以上。该方法重复性、稳定性和精密度试验的RSD均在3%以内,表明此分析方法稳定、可靠,可用于半枝莲药材质量分析。 在药效研究基础上,建立了半枝莲有效部位中4种有效成分野黄芩苷、异野黄芩素-8-O-葡萄糖醛酸苷、异野黄芩素和木犀草素定量分析及指纹图谱定性分析方法,并通过分析方法学验证表明,所建方法的精密度、重现性和回收率均符合要求,可用于半枝莲总黄酮有效部位的质量控制研究。