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目的:通过MCF-7细胞增殖试验,确定人乳腺癌细胞MCF-7最佳的培养条件、给药方式和给药时间;研究金雀异黄素在低雌激素水平情况下对雌激素依赖阳性人乳腺癌细胞MCF-7的生长影响,揭示其促癌作用的可能机制。方法:采用四甲基偶氮噻唑蓝法(MTT)绘制细胞生长曲线,比较不同来源的MCF-7细胞对雌二醇(E2)的敏感性,观察4种不同培养条件对MCF-7细胞增殖的影响以及MCF-7细胞在去雌激素培养基中培养不同时间对雌激素的敏感性试验。采用MTT试验检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期分布情况,磷脂结合蛋白V /碘化丙啶(Annexin V/PI)联合双染法检测细胞凋亡,间接免疫荧光法测定雌激素调节蛋白(presenilin 2, PS2)的表达以及在金雀异黄素与雌激素受体特异性抑制剂ICI-182780联合作用情况下对MCF-7细胞的生长影响。结果:两种不同来源的人乳腺癌细胞MCF-7中细胞A对雌激素较为敏感,当雌二醇浓度为10-9 mol/L时,对MCF-7细胞的刺激作用最明显,DMEM培养基中的酚红、新生牛血清中的内源性雌激素对MCF-7细胞具有刺激作用。当MCF-7细胞经过去雌激素处理以后,与对照组相比,金雀异黄素在5×10-7~10-5 mol/L时可以促进细胞增殖,G0/G1期细胞向S期推进,PS2蛋白表达增加,但是抑制细胞凋亡作用并不明显,并且雌激素受体特异性抑制剂ICI-182780可以阻断金雀异黄素对人乳腺癌细胞MCF-7的刺激作用。结论:不同来源的人乳腺癌细胞MCF-7对雌激素敏感性不同,MCF-7细胞增殖试验受培养条件、在去雌激素培养基中培养时间等因素的影响。金雀异黄素在低雌激素水平情况下可以促进人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖、DNA合成以及PS2蛋白的表达,具有一定的雌激素样作用,并且刺激作用可能是通过雌激素受体(ER)介导的。