淫羊藿苷修复SD大鼠牙槽骨缺损的实验研究

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目的:本实验观察淫羊藿苷局部使用时对SD大鼠牙槽骨缺损修复的影响,并筛选适宜浓度的淫羊藿苷,以期为临床修复牙槽骨缺损使用更经济、更易获得的促成骨因子提供一定依据。方法:1.淫羊藿苷对牙槽骨缺损的修复效果观察:33只6-7周龄健康雄性SD大鼠,随机分成3组(空白组、AGS组、ICA/AGS组),每组11只,利用手持式颅钻在大鼠左下前牙制作4mm×2mm×1.5mm箱型牙槽骨缺损,根据分组情况:空白组直接缝合,AGS组在缺损处置入明胶海绵,ICA/AGS组在缺损处置入ICA/AGS复合物,术后2、3、4周各组随机处死3只动物,留取标本,Micro-CT扫描分析各组新生牙槽骨骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、平均小梁间距(Tb.Sp)、平均小梁厚度(Tb.Th),组织切片后行HE染色光镜下观察各时段各组牙槽骨改变情况。2.淫羊藿苷促进牙槽骨缺损修复的最佳浓度:选用66只6-7周龄健康雄性SD大鼠,随机分成6组(A、B、C、D、E组和空白组),每组11只,同第一部分方法制作牙槽骨缺损动物模型,在缺损处置入不同浓度ICA/AGS复合物(依次为1mg/m L、1.5mg/m L、2mg/m L、2.5mg/m L、3mg/m L),术后2、3、4周于各组随机处死3只动物,用第一部分同样的方法留取、检测标本。结果:1.淫羊藿苷对牙槽骨缺损的修复效果观察:术后2W空白组及AGS组在Micro-CT扫描中未见明显新骨形成,在实验组观察到了少量新骨,术后3W、4W三组都有新骨形成,比较各时间段三组间的BV/TV、Tb.N、Tb.Sp、Tb.Th,ICA/AGS组的成骨效果均最好,与其他两组间各指标差异都有统计学意义(p<0.05)。HE染色显示术后2W各组开始骨修复,此时可见出血、炎性肉芽组织。术后3W缺损区以纤维为主,成骨细胞开始聚集,ICA/AGS组成骨活跃。术后4W三组均可见新生骨小梁,ICA/AGS组骨质更为致密。2.淫羊藿苷促进牙槽骨缺损修复的最佳浓度:Micro-CT扫描观察到各组在术后2W、3W、4W都有新骨形成,比较各组与空白组间的BV/TV、Tb.N、Tb.Sp、Tb.Th,2W时未见明显差异,但在3W、4W五组都较空白组效果更佳,且差异有统计学意义(p<0.05)。对比A、B、D、E四组与C组的各项指标,2W时仅A组与C组的骨量差异有统计学意义(p<0.05),3W时C组在骨量和成骨质量上都表现出更佳的效果,4W时A组与C组的各项指标有统计学差异,其余三组仅与C组在成骨质量上有统计学差异(p<0.05)。组织学检查发现各组在2W可见出血或新生毛细血管;3W时新生的毛细血管逐渐机化,缺损区出现新生纤维结缔组织,成骨细胞增多,并可见新生骨小梁;术后4W时新生骨质基本成熟。结论:淫羊藿苷能促进SD大鼠牙槽骨缺损区修复;明胶海绵负载淫羊藿苷在SD大鼠口内环境局部使用时的最佳浓度为2mg/m L。
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