2010年,Popescu教授团队命名了 一个全新的间质细胞群体——Telocytes,并将其带入了大众的视野中。目前,大众对TCs的超微结构已有了较为系统的认识:它的胞体通常为椭圆形,由一个约1/4体积大小的核以及少量的细胞质组成,细胞质中富含大量的线粒体、高尔基复合体、内质网等细胞器。且区别于其它的细胞,TCs拥有1-5个长度从数十到数百微米不等的极细长的典型突起。目前,透射电镜检测是鉴定TCs的最好手段,同时利用免疫组织化学标记和免疫荧光标记等方法,可更好的检测和鉴定不同动物、不同器官和不同组织中的TCs。从2010年TCs被发现至今,已在多种动物的多种器官中被发现,但其在犬等伴侣动物皮肤系统中的分布和功能仍处于初始阶段。皮肤是犬类面积最大的器官,它与外界物质环境直接接触,是机体最重要的第一道屏障结构。除此之外,皮肤内部还富含丰富的血管、神经组织和大量的结缔组织。这样一方面可以将接受到的外界刺激传递给机体内部器官,引起相应的生理反应;另一方面,机体内部组织器官的病变和异常也会通过皮肤得到体现。因此,本研究以犬皮肤为研究对象,通过多种免疫标记技术和透射电镜的方法,探究了犬皮肤在正常状态和创伤愈合过程中,TCs的分布特点和超微结构特征,可以更全面的研究皮肤创伤愈合的机理,为TCs可能作为皮肤创伤愈合的调控信号提供了形态学依据。试验Ⅰ犬正常皮肤Telocytes的观察鉴定和分布特点Telocytes是近年来新发现和命名的一种新型间质细胞,在多种动物的不同组织和器官中已被证实。且随着时代的发展,犬作为伴侣宠物越来越多出现在大众的视野中,成为人类家庭的一员。但在临床研究中,犬等伴侣动物的皮肤系统中的TCs研究仍处于起步阶段。本试验采用HE染色法、免疫组化标记法、免疫荧光标记法、透射电镜技术等多种方法,观察和鉴定了犬皮肤中TCs的形态结构,及其分布特点。结果显示,在犬的皮肤中,真皮层和皮下组织中均有TCs的分布,但细胞在形态和分布上存在一定的差异。在真皮层中,TCs的细长突起通常与表皮层平行分布。在皮下组织中,TCs常分布在毛囊与毛囊之间、汗腺周围、结缔组织中等地方。在透射电镜下可观察到,TCs环绕毛囊、汗腺和血管,在皮肤中与邻近组织形成三维网络状结构。本试验研究了犬皮肤中TCs的分布特点,及其超微结构,为TCs在犬皮肤研究中提供了新的临床思路。试验Ⅱ犬皮肤创伤愈合过程中Telocytes结果变化的观测鉴定犬皮肤创伤是临床中最常见的病症之一,可见于多种情况下,如刺碰伤、刀割伤、烧伤、咬伤等情况中。轻度的皮肤创伤通常可自愈,但重度创伤的创口皮肤缺损严重,甚至影响犬类的健康和美观。在宠物临床中,有多种多样的方法针对皮肤创伤治疗。但皮肤创伤愈合的机理,以及如何更快更好的促进创伤愈合,一直都是临床研究的热点之一。本试验通多种染色方法观察创伤形成后,愈合第三天、第七天和第十一天犬创口旁皮肤组织中TCs的形态结构,及其分布特点。并将其分别于正常犬皮肤组织相对比,结果显示:在创口愈合过程中,第十一天创口几乎愈合;真皮层的TCs数量逐渐增多,并在十一天时形成完整的TCs层。且随着愈合时间的增长,毛囊群和汗腺周围的TCs逐渐形成完整的环状包围在外层;皮下组织中也逐渐形成TCs网络样结构。根据结果,我们推测TCs对皮肤代谢和稳态起着重要的意义,同时,在创伤的愈合过程中可能作为皮肤创伤愈合的调控信号,对临床创伤治疗起着积极的作用,也为临床皮肤创伤的治疗提供新的思路。试验Ⅲ犬皮肤石蜡切片制作程序的优化制作石蜡切片是组织学研究中最常用的方法之一,也是研究犬皮肤中TCs最常用的方法之一。犬皮肤组织切片主要制作流程通常包括取材、固定、包埋、切片等。但因犬皮肤组织结构较为松散,皮下组织层较厚,其石蜡切片制作过程中常碎裂不完整,且石蜡片易脱片,严重影响试验开展。本试验通过改良犬皮肤石蜡切片的制作程序,从而优化皮肤TCs的切片染色程序。通过取犬皮肤组织,改变不同石蜡切片厚度和不同试剂处理时间,对石蜡切片流程进行优化,观察犬皮肤石蜡切片不同条件下的结果。结果表明,当二甲苯透明时间为5min,切片厚度设置为7 μ m时,犬皮肤石蜡切片得到的染色结果较为清晰,观察到的TCs的结构也较为完整。