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目的 研究FBX022基因在肾癌细胞中对迁移、侵袭、增殖及血管形成能力的影响,并探究其发挥作用的相关分子机制。方法 应用免疫组化SP法检测277例肾癌组织、35例正常肾组织中FBX022的表达情况。分别用阴性对照小干扰siRNA-Control和FBX022小干扰siRNA-FBX022转染肾癌细胞株786-0和ACHN,通过Western Blot检测siRNA-FBX022对两种肾癌细胞株FBX022蛋白表达的影响。通过sh-FBX022慢病毒使FBX022基因沉默从而构建786-0和ACHN两种肾癌细胞的sh-FBX022稳转细胞株,同时利用sh-Control构建对照组稳转细胞株;CCK8细胞增殖实验观察沉默FBX022基因对肾癌细胞786-0和ACHN增殖能力的影响;Transwell细胞迁移实验检测沉默FBX022基因后对786-0和ACHN两种肾癌细胞迁移能力的影响;Transwell细胞侵袭实验检测沉默FBX022基因后对786-0和ACHN两种肾癌细胞侵袭能力的影响;用明胶酶谱法研究沉默FBXO22基因对786-0及ACHN细胞分泌MMP-9活性的影响;用Western Blot实验研究沉默FBX022 基因对 786-0 及 ACHN 细胞中 N-cadherin、MMP-9、TIMP-1 及 VEGF蛋白表达情况;然后使用HUVEC细胞进行CCK8细胞增殖实验和血管生成实验,观察沉默FBX022基因对肾癌细胞血管生成的作用,利用ELISA实验检测转染后的两种肾癌细胞上清液中VEGF的分泌变化。体内实验:通过sh-FBX022慢病毒使FBX022基因沉默从而构建786-0 sh-FBX022稳转细胞株,同时利用sh-Control构建对照组稳转细胞株,通过裸鼠尾静脉注射,构建转移裸鼠模型,六周后用小动物活体成像系统检测裸鼠肺转移瘤生物发光情况,研究FBX022在肿瘤转移中的作用,同时观察裸鼠生存情况。结果 1、在157例(56.7%)RCC组织和在30例(85.7%)正常肾组织观察到FBX022的高表达水平;FBX022在肿瘤直径>7cm组中的高表达率明显低于≤cm组,差异有统计学意义(P=0.047);肿瘤中晚期患者组的FBX022的高表达率显著低于肿瘤早期患者组,差异有统计学意义(P=0.020);FBX022的低表达与较差的5年总生存率(P=0.001)和5年无病生存率(P=0.003)相关,差异有统计学意义。2、Western Blot实验显示,与siRNA-Control组相比,沉默FBX022基因后786-0及ACHN两种肾癌细胞中FBX022表达量降低,差异有统计学意义(P<0.001);3、CCK-8细胞增殖实验显示:与siRNA-Control组相比,沉默FBX022基因对786-0及ACHN两种肾癌细胞的增殖无影响,组间差异无统计学意义(P>0.05)。4、细胞迁移、侵袭实验显示:与siRNA-Control组相比,沉默FBX022基因促进786-0和ACHN细胞中的细胞迁移和侵袭,差异有统计学意义(P<0.001);5、明胶酶谱实验显示:与对照组相比,siRNA-FBX022组786-0和ACHN细胞分泌的MMP-9的酶活性增强,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);6、Western Blot实验显示:siRNA-FBXO22组786-0 和 ACHN 细胞中 N-cadherin、MMP-9、VEGF 的蛋白表达水平比 siRNA-Ctrl组明显增加,而TIMP-1的表达量显著下降且两组比较差异有统计学意义(P0.001);7、HUVEC的增殖及其血管生成实验显示:与siRNA-Ctrl组相比,转染siRNA-FBX022组786-0和ACHN两种肾癌细胞上清使HUVEC的增殖及血管形成能力明显增强且两组比较差异有统计学意义(P<0.01);8、ELISA实验显示:与siRNA-Ctrl组相比,沉默FBX022基因后,786-0和ACHN细胞分泌VEGF的水平得到了显著的升高,差异有统计学意义(P<0.01)。体内实验:生物发光成像结果显示:与786-O-luc-shRNA-Control组相比,注射786-O-luc-shRNA-FBX022细胞的裸鼠更容易肺转移,生存曲线显示sh-FBX022组裸鼠的生存期与sh-Control组相比明显缩短,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:1、在肾癌中FBX022基因表达下调,其低表达与肿瘤大小,TNM分期及较差的预后相关。2、沉默FBX022基因后N-cadherin的蛋白表达上调,影响肾癌的EMT进展。3、沉默FBX022基因促进VEGF的表达和分泌并最终促进肾癌细胞的血管形成。4、在体内实验中,沉默FBXO22促进肾癌的肺转移。因此FBXO22基因可能是判断肾癌转移的新的分子标志物,将在以后的研究及治疗中发挥重要作用。