猴脑选择性超深低温断血流复苏对TGF-β1及MMP-9影响的实验研究

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【目的】观察猴脑常温缺血10分钟后选择性超深低温断血流复苏后转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的变化。【方法】健康恒河猴9只,随机分成等温组、低温组。分离双侧颈内动静脉、颈外动静脉,右侧颈内静脉近心端插管监测中心静脉压。右侧颈内动脉远心端插管连接冷灌注系统,右侧颈内静脉远心端及双侧股静脉近心端插管连接超滤复温装置,建立脑局部体外循环。全身肝素化,夹闭双侧颈外动静脉、左侧颈内动静脉10分钟,再向右侧颈内动脉内输入4℃林格氏液,维持脑温≤16℃约60分钟。停止灌注,恢复上述血管血流,使脑自然复温。手术前后行头颅MRI检查,术后做神经功能缺失评分。等温组实验猴灌注死亡后立即开颅取脑,低温组实验猴复苏后饲养到术后12周处死开颅取脑,4%多聚甲醛固定、脱水、石蜡包埋、切片,用TGF-β1、MMP-9抗体进行免疫组化染色,并对额叶恒定视野内TGF-β1、MMP-9的表达水平进行统计学分析。【结果】常温组2只实验猴于灌注后直接死亡,术后头颅MRI检查可见缺血灶;额叶TGF-β1有微量表达,MMP-9有大量表达。低温组7只实验猴成功建立实验模型,术后安全复苏并长期健康存活,术后头颅MRI检查未见异常,神经功能评分无异常;7只低温组实验猴TGF-β1表达均较明显上调,MMP-9表达均较明显下调,与等温组比较均有差异(P<0.05)。【结论】阻断猴双侧颈内动脉血流10分钟后脑选择性超深低温灌注60分钟可安全复苏,断血流及复苏对血流动力学及神经功能无明显影响。实验可引起TGF-β1表达上调,同时抑制了MMP-9过量表达,提高了神经细胞对缺血缺氧的耐受性,并抑制凋亡,促进受损脑细胞的修复,是脑缺血的重要保护机制之一。
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