Rho蛋白(RhoA、RhoB、RhoC)及mRNA在喉癌中的表达及意义

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实验目的喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤,其发病率目前有明显增长趋势。喉癌在东北地区发病率较高,是严重的致残和致死性疾病之一。肿瘤相关基因的研究有助于探索新型的肿瘤标志物,促进肿瘤特异性诊断技术的开发和应用。Ras癌基因是早期发现的可以导致细胞发生恶性转化的癌基因之一。Rho与Ras同属于小G蛋白,是细胞内一类重要的信号转导分子。Rho蛋白参与细胞骨架重组,基因转录调控,和细胞信号转导等生理过程,影响细胞的极性、粘附、生长和运动能力。近年来的研究表明,Rho蛋白在肿瘤的形成、转化、生长、浸润以及转移中起着重要的作用。RhoA和RhoC都能促进体外培养的小鼠的纤维母细胞的转化。已经发现RhoA和RhoC在几个肿瘤细胞系中有过表达的现象,当肿瘤变得更具有侵袭性时,它们的表达也逐渐地增加。最近的研究表明RhoB对于促进应激诱导的凋亡和抗肿瘤活性是至关重要的。在头颈部正常上皮细胞中,原位癌和高分化肿瘤中,能够检查到RhoB的表达,而随着肿瘤变得深入浸润时,它的表达就相当的微弱,很难被检测出来.相反的是RhoA蛋白水平随着肿瘤的进展而增加。研究Rho蛋白(RhoA、RhoB、RhoC)及mRNA在喉癌组织、癌旁组织的表达情况,及其与淋巴结转移之间的关系,探讨其与喉癌的发生、发展以及转移之间的关系。材料与方法选用2004年2月—2006年6月期间在解放军463医院耳鼻喉科首次进行手术的原发喉癌,共51例。采用免疫组化方法检测Rho蛋白(RhoA、RhoB、RhoC)的表达及分布情况;采用RT-PCR方法检测Rho蛋白(RhoA、RhoB、RhoC)—mRNA的表达及分布情况。实验结果1.喉癌内组织RhoA蛋白表达的阳性率高于癌旁组织;喉癌内组织RhoB蛋白表达的阳性率低于癌旁组织;喉癌内组织RhoC蛋白表达的阳性率高于癌旁组织。淋巴结转移组中,RhoA与RhoC蛋白的表达阳性率高于在淋巴结未转移组中的表达,RhoB蛋白在淋巴结转移组中的阳性率明显低于未转移组的表达阳性率。2.RhoA-mRNA在喉癌组织的表达高于癌旁组织的达;RhoB-mRNA在喉癌组织中的表达低于癌旁组织中的表达;RhoC-mRNA在喉癌组织中的表达高于癌旁组织中的表达。RhoA-mRNA、RhoC-mRNA的表达与喉癌的临床分期呈正相关性;而RhoB-mRNA的表达与喉癌的临床分期呈负相关。RhoA-mRNA、RhoC-mRNA在淋巴结转移组的喉癌组织中表达明显高于未转移组。而RhoB-mRNA的表达则与前两者相反。结论Rho(RhoA、RhoB、RhoC)蛋白基因的表达在喉癌的发生、浸润以及淋巴结转移的机制中起一定的作用。RhoA、RhoC在喉癌发生、发展及转移中起到促进作用,发挥了癌基因的作用。它们可能作为喉癌发生、浸润及局部淋巴结转移的分子生物学指标,对预测喉癌的发生、局部淋巴结转移以及预后有一定价值。而RhoB在喉癌中起到了抑制肿瘤生长、局部淋巴结转移的作用。进一步研究RhoB蛋白的功能及其在肿瘤学方面的作用,可能对发展喉癌的基因治疗具有重要意义。
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