小檗碱对人卵巢癌细胞SKOV-3、A2780 TDO、AhR mRNA表达影响的研究

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研究背景与目的:卵巢癌是死亡率最高的女性生殖道恶性肿瘤,在过去的30年,随着医疗技术的发展,但卵巢癌5年生存率未得到明显提高。肿瘤免疫逃逸是导致该类患者预后不良的主要因素之一,色氨酸-2,3双加氧酶(Tryptophan-2,3-dioxygenase,TDO)是介导机体免疫抑制、肿瘤免疫逃逸的关键因子,卵巢癌存在TDO高表达,抑制TDO表达和活性可期改善卵巢癌患者的免疫抑制,克服肿瘤免疫逃逸,进而改善预后。研究表明:小檗碱可抑制TDO活性,但小檗碱能否下调卵巢癌TDO mRNA的表达、抑制已高表达的TDO的活性进而下调其下游因子芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)的表达等问题尚缺乏研究。本实验将对小檗碱对人卵巢癌细胞TDO、AhR mRNA表达影响进行研究。研究方法:利用实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测IC50浓度的小檗碱作用0h、2h、6h后SKOV-3和A2780细胞TDO、AhR mRNA的表达情况;实验结果:1.小檗碱(IC50分别为2.48±0.269μmol/L和2.41±0.157μmol/L)能显著抑制SKOV-3细胞、A2780细胞TDO的表达,且抑制活性随着药物作用时间延长而增强;2.小檗碱能显著抑制存在TDO高表达的SKOV-3细胞AhR mRNA的表达,同时抑制活性随着药物作用时间延长而增强,小檗碱IC50浓度作用于2h、6h A2780 AHR mRNA不表达。结论:1.本研究发现SKOV-3和A2780细胞均存在TDO mRAN高表达,;2.小檗碱下调TDOmRNA表达、可能通过减少卵巢癌细胞上清色氨酸消耗的作用,进而减少犬尿氨酸代谢产生,下调AHR表达。3.小檗碱可改善卵巢癌免疫抑制状态,且对I型和II型卵巢癌可能都有效。
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