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目的:检测干细胞基因Oct4在胃癌细胞株MKN28、SGC7901和BGC823中的表达情况,干扰高表达Oct4的胃癌细胞株中Oct4基因表达,研究Oct4基因被干扰后胃肿瘤细胞的恶性侵袭性变化,进而最终探讨Oct4基因与胃肿瘤细胞的恶性度关系。方法:1.利用半定量RT-PCR技术检测恶性度由高到低的三株胃癌细胞内的Oct4 mRNA表达情况,确定Oct4 mRNA相对高表达的胃癌细胞株。2.利用Oct4 RNA干扰片段干扰高表达Oct4的胃癌细胞株,并通过荧光定量PCR和Western-bloting检测Oct4基因被干扰后的表达情况。3.利用Transwell细胞体外侵袭实验检测空白对照组、阴性siRNA组以及Oct4 siRNA组的胃癌细胞侵袭性变化,重复同样实验三次。结果:1.半定量RT-PCR结果显示,在三株胃癌细胞中Oct4 mRNA表达水平由高到低依次是BGC823、SGC-7901、MKN28。2.对BGC823细胞的Oct4基因进行干扰后,荧光定量PCR及Western-bloting检测结果均显示干扰后的Oct4表达水平明显下降,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3.Transwell细胞体外侵袭实验结果显示,干扰Oct4的表达后BGC823细胞(Oct4siRNA组)穿过膜的数量与空白对照组和阴性siRNA组分别比较,均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.三株胃癌细胞分化程度由低到高依次为BGC823、SGC-7901、MKN28,同时检测Oct4 mRNA表达水平由高到低依次也是BGC823、SGC-7901、MKN28,提示Oct4基因在维持肿瘤细胞低分化状态中起重要作用。2.干扰Oct4后的胃癌细胞BGC823的侵袭性明显下降,表明Oct4基因的表达与胃癌细胞恶性侵袭能力直接相关,提示Oct4在胃癌细胞的侵袭性方面起重要作用。