论文部分内容阅读
光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是对恶性肿瘤的一种有效的治疗手段,而光源和光敏剂是PDT的两大因素。PDT中常用的激光光源由于适用波长少、成本高制约了PDT的发展;而以往的PDT治疗中所用的光敏剂由于种种缺点造成了治疗效果的不确定,也影响了PDT的推广应用。
金丝桃素是从贯叶连翘中提取的一种颇有潜力的高效PDT光敏剂,但也存在提取困难价格昂贵的问题。本课题就从这些方面着手,探索了以发光二极管(LED)为光源代替激光光源、以贯叶连翘中金丝桃素粗提物为光敏剂的光动力治疗对肿瘤细胞的体外杀伤效应,希望找到一种改良的PDT方法,在保证疗效的同时降低治疗成本,从而为PDT推广应用提供参考。主要的研究内容有:
(1)用薄层色谱及HPLC法对金丝桃素样品进行简单分析。
(2)进行了改良PDT方法的条件优化。以HepG2肝癌细胞为例,分析金丝桃素样品的吸收光谱及细胞对金丝桃素样品的吸收,用三种不同波长范围的光源激发金丝桃素进行体外细胞毒试验,并研究了给药一光照的时间间隔等因素对PDT效果的影响,以MTT比色法来比较各种条件下的药效作用。
(3)研究了金丝桃素提取物对人肝癌细胞株HepG2、肺癌细胞株A549和SpcAl及乳腺癌细胞株MDA231的体外PDT效应,通过检测细胞对金丝桃素样品的吸收来确定给药后与光照的时间间隔,用显微镜观察、MTT比色法和DNA电泳等方法来评价金丝桃素的抗癌效果。
(4)以A549细胞为例比较了不同金丝桃素提取物样品的PDT效果。
(5)研究了PDT后43℃热疗30 min对MDA231细胞的PDT效果的影响。
本文的主要研究结果如下:
(1)波长处于金丝桃素最大吸收峰(590 nm)处的黄色LED光源激发的PDT效果最好;给药后6 h光照比给药后1 h光照效果好,这与给药后细胞内药物浓度达到最高峰的时间一致。
(2)光活化的金丝桃素提取物对四种细胞均有显著的体外杀伤效应,其效果随着金丝桃素浓度与光照时间(光照能量)的增加而增加。
(3)不同纯度的金丝桃素样品的:PDT效果不一样,贯叶连翘中的某些成分对HY的PDT作用有一定的影响。
(4)PDT后43℃热疗30 min可以提高MDA231细胞的生长抑制率。热疗与HY—PDT有协同作用。
本文的研究结果表明:以LED代替激光光源为光源、以贯叶连翘中金丝桃素粗提物为光敏剂的光动力疗法对HepG2、A549、SpcAl和MDA231等四种癌细胞均呈现出显著的体外细胞毒作用,这种改良的PDT治疗方法在癌症治疗中具有广阔的前景。