堆肥中木质降解素复合菌的筛选及其生理特性研究

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木质素的有效降解是秸秆等农业废物减量化及资源化利用的难点。在自然界中,木质素的完全降解是真菌、细菌及相应微生物群落共同作用的结果。因此,木质素降解复合菌的开发对于木质素的降解有着重要的意义。本文采用连续驯化培养的方法,从农业废物堆肥过程升温、降温和腐熟3个阶段的微生物菌群中分别筛选驯化出3组具有木质素降解能力的复合菌MC1、MC2和MC3。通过初筛和复筛实验,筛选出一组性能稳定并具有高效木质素降解能力的复合菌,并对其继代培养的稳定性进行了验证;然后对所筛选出的具有最强木质素降解能力的复合菌MC1进行营养调控研究,优化提高其木质素降解能力;最后对复合菌MC1对天然木质素的降解能力进行了研究。初筛和复筛实验结果表明,从堆肥升温阶段筛选出的复合菌MC1的木质素降解能力最强。在37℃静置条件下液态发酵培养14 d,d 6时复合菌MC1各酶活值均达到最大,其中木质素过氧化物酶酶活为258.37 U L-1,锰过氧化物酶酶活486.39 U L-1,漆酶酶活49.25 U L-1;d 14时木质素降解率达到36.25%。继代培养实验结果表明复合菌MC1具有较好的稳定性。复合菌MC1的营养调控正交试验研究表明,该复合菌的最佳培养条件是:摇床转速为120 rpm,第一碳源为蔗糖,氮源为蛋白胨,添加诱导剂ABTS、藜芦醇和吐温80,添加微量元素Cu2+和Mn2+,且第二碳源碱木质素的加入时间为培养的第2 d。在此最佳综合培养条件下,复合菌MC1培养6d后的LiP酶活为579.91 UL-1,MnP酶活为882.49 U L-1,Lac酶活为80.94 UL-1,培养10d后的木质素降解率为46.75%。复合MC1对天然木质素降解实验结果表明,该复合菌对天然木质素具有很强的降解能力,在固态发酵培养30 d后,木质素降解率为48.75%,降解稻草中的木质素结构被严重破坏,难降解的大分子长键烃被切断成易降解的小分子短键烃。
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