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目的:探讨IL-4是否介导JAK1/STAT6通路促进小胶质细胞向M2型极化,减轻脑出血后炎症反应和减少神经细胞凋亡以促进神经功能损伤恢复?方法:1.通过建立凝血酶诱导BV2细胞分化模型,使用CD16/32作为M1型小胶质细胞的标志物,CD206作为M2型的标志物,利用免疫荧光方法检测Iba-1+CD16/32、Iba-1+CD206荧光蛋白表达共定位,明确BV2细胞是否在凝血酶诱导后被激活,且分别检测出两组标记物共定位表达各自相对荧光强度。再将凝血酶诱导后的BV2细胞分为四组:(1)Control组:仅凝血酶诱导BV2细胞分化模型组;(2)Thr+PBS组:凝血酶诱导BV2细胞分化模型的PBS组;(3)Thr+IL-4组:凝血酶诱导BV2细胞分化模型的IL-4组;(4)IL-4+AG组:凝血酶诱导BV2细胞分化模型的IL-4和AG-490组。利用Western blot方法检测p-JAK1、JAK1、p-STAT6和STAT6等通路蛋白的表达水平,利用免疫荧光技术检测BV2细胞中Iba-1+CD16/32和Iba-1+CD206共定位表达细胞相对荧光强度。2.利用胶原酶VII建立小鼠脑出血模型,将C57BL/6小鼠随机分成四组:(1)Control组:正常对照组;(2)Sham组:假手术组;(3)ICH-PBS组:ICH模型PBS注射组;(4)ICH-IL-4组:ICH模型IL-4注射组。各组小鼠在术后第1、3、7天分别进行行为学检测、脑水肿检测、脑血肿体积测量。利用Western blot方法检测脑出血后第3天不同组中p-JAK1、JAK1、p-STAT6和STAT6通路蛋白和cleaved-caspase-3、BAX和Bcl-2凋亡相关蛋白的表达水平,通过免疫荧光染色检测NeuN+caspase-3、Iba-1+CD16/32和Iba-1+CD206共定位表达情况,对不同组别的数据资料进行统计分析,观察各研究指标间的差异是否具有统计学意义。结果:1.体外实验中,检测到凝血酶诱导的BV2细胞明显极化为M1/M2型,其中以M1型为主;Thr+IL-4组中,检测出JAK1/STAT6信号通路相关蛋白表达显著上调,细胞中Iba-1+CD206荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著增强,而细胞中Iba-1+CD16/32荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著减弱,但是相比Thr+IL-4组,上述结果被显著逆转,即IL-4-AG组中p-JAK1/JAK1和p-STAT6/STAT6比值显著下调,细胞中Iba-1+CD206荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著减弱,而细胞中Iba-1+CD16/32荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著增强;2.在体内实验中,利用胶原酶VII建立C57小鼠脑出血模型,IL-4处理后,小鼠的神经功能损伤显著改善,出血侧半脑脑水肿程度显著减轻,脑血肿体积显著减小;与ICH-PBS组比较,ICH-IL-4组中Iba-1+CD206荧光蛋白表达共定位的细胞显著增多,而Iba-1+CD16/32荧光蛋白表达共定位的细胞显著减少;与ICH-PBS组比较,ICH-IL-4组中BAX和cleaved-caspase-3凋亡相关蛋白表达水平显著下调,而Bcl-2抗凋亡蛋白表达水平明显上调,且p-JAK1/JAK1和p-STAT6/STAT6的比值也显著上调。结论:IL-4可以通过介导JAK1/STAT6通路促进小鼠脑出血后M2型小胶质细胞极化发挥神经保护作用。