姜黄素抑制NF-κB活化过程对颗粒诱导骨溶解影响的体内实验研究

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目的:通过探讨姜黄素对NF-κB活化过程的影响,研究姜黄素对聚乙烯颗粒诱导骨溶解的治疗效果及作用机制,为预防和治疗人工关节置换术后假体无菌性松动提供新思路。方法:随机选取30只4周大雄性BALB/c小鼠并建立背部气囊,一周后随机杀死其中10只并取其颅骨片,植入其它小鼠背部气囊,建立小鼠气囊植骨模型。动物模型建立后分为以下4组:空白组(A组)、聚乙烯组(B组)、溶剂组(C组)、姜黄素组(D组)。建模后第一天向空白组气囊内注射1ml生理盐水,其余三组小鼠气囊内注射等量聚乙烯颗粒悬浊液。用DMSO溶解姜黄素,并以玉米油定容,制备浓度为5mg/ml的姜黄素溶液,同时制作不含姜黄素的相同成分溶剂。建模后第2天开始,每天向姜黄素组气囊内注射0.2ml姜黄素溶液(姜黄素用量为50mg/kg/d),向溶剂组气囊内注射等量溶剂,其余两组注射等量生理盐水。21天后处死所有小鼠,取出背部气囊及骨片。行TRAP染色检测骨片中破骨细胞的数量。液氮碾磨法处理气囊组织,分别提取总RNA和总蛋白,QPCR检测c-FOS、NFATc1的mRNA表达水平,行western blot检测气囊组织中IκBα以及p-IκBα的蛋白含量。结果:TRAP染色发现,在聚乙烯组和溶剂组骨片中染色的破骨细胞较多,而空白组和姜黄素组极少或没有染色的破骨细胞。QPCR检测发现,基因表达情况:c-FOS:聚乙烯组>溶剂组>空白组>姜黄素组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P<0.01);NFATc1:聚乙烯组>溶剂组>空白组>姜黄素组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P<0.01)。western blot检测发现,IκBα蛋白相对灰度值:姜黄素组>空白组>溶剂组>聚乙烯组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P<0.01);p-IκBα蛋白相对灰度值:聚乙烯组>溶剂组>空白组>姜黄素组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在小鼠气囊植骨模型中,姜黄素可以通过抑制NF-κB的活化以及c-FOS、NFATc1的表达来抑制超高分子量聚乙烯诱导的骨溶解反应。
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