聪智颗粒剂是以石菖蒲等八味中药组成的中药复方制剂,具有温胆祛痰、行气燥湿、理气健脾、活血祛瘀等功效,临床上主要用于预防和治疗老年痴呆。前期的药理学实验表明该方能显著提高模型大鼠海马乙酰胆碱转移酶(ChAT)和乙酰胆碱(Ach)的活性,能改善模型大鼠海马区NOS神经元的损伤,激活cNOS的活性,促进NO的合成,提高阿尔茨海默病大鼠脑组织NGF的含量,使大鼠记忆力具有明显改善作用。本课题以中医药理论为指导,在前期临床应用和药理学研究的基础上,应用现代制药技术和研究方法,对聪智颗粒剂的制备工艺及质量标准进行了系统全面的实验研究,确定科学合理的制备工艺,确保药品制剂安全有效、质量稳定可控,适合工业化大生产。一、制备工艺研究该方由八味中药组成,前期研究表明,方中挥发性成分及其非挥发部位为有效组分。本研究直接进行水煮醇沉和制剂成型的工艺研究。水煮工艺研究:提取挥发油后的药渣与其余药材进行合并煎煮,采用正交试验法,以辛弗林含量、毛蕊花糖苷含量、人参皂苷Re+Rg1、Rb1含量及浸膏得率为评价指标,考察了加水量、提取时间、提取次数对水提效果的影响,从而优选出最佳水提工艺为:第一次加12倍量水浸泡1h,回流煎煮1.5h,第二次加10倍量水回流煎煮1h,第三次加8倍量水回流煎煮1h。其中,辛弗林、毛蕊花糖苷、人参皂苷Re+Rg1、Rb1平均含量分别为 4.435mg/g,0.226mg/g,0.1768mg/g,0.1356mg/g(n=3),平均浸膏得率为39%(n=3)。醇沉工艺研究:采用正交试验法,以辛弗林含量、毛蕊花糖苷含量、人参皂苷Re+Rg1、Rb1含量及浸膏得率为评价指标,考察了药液密度、含醇量、醇沉时间对醇沉效果的影响,从而优选出最佳醇沉工艺为:药液相对密度1.15g/mL(70℃),含醇量70%,醇沉24h。其中,辛弗林、毛蕊花糖苷、人参皂苷Re+Rg1、Rb1平均含量分别为3.521mg/g,0.192mg/g,0.1679mg/g,0.1260mg/g(n=3),平均浸膏得率为27%(n=3)。制剂成型工艺:通过对比试验考察了不同辅料及其用量对制粒情况的影响。结果,按原药材:辅料=1.6:1的比例加入糊精-安赛蜜(100:1),将二者混匀后,湿法挤压制粒,80℃以下干燥,,喷入用95%的乙醇溶解的挥发油,密闭24h后用铝膜包装。二、质量标准研究薄层色谱法定性研究:采用TLC法对聪智颗粒剂中所含A、B、C、D四味药进行了鉴别。试验结果表明,供试品色谱中,在对照药材或对照色谱相应的位置上,均显相同颜色的斑点,而阴性对照在相应位置无干扰。且经多次试验,重现性良好。高效液相色谱法含量测定研究:采用HPLC法测定了聪智颗粒剂中辛弗林含量、毛蕊花糖苷含量。前者含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相:甲醇-0.1%磷酸二氢钾(50:50),流速0.84mL/min,柱温34℃,检测波长275nm,并进行了方法学考察。后者含量测定亦用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相:乙腈-0.2%冰醋酸(13.2:86.8),流速1.OmL/min,柱温32℃,检测波334nm,并进行了方法学考察。结果表明该方法合理可行,重现性好,可用于聪智颗粒剂的质量控制及质量标准草案的制订。本品每袋以辛弗林计,不得少于2.3963mg本品每袋以毛蕊花糖苷计,不得少于0.2207mg三、中试放大研究该部分实验主要考察水煮醇沉工艺,制剂工艺是否适合工业化生产,考察指标为成品率、辛弗林转移率、毛蕊花糖苷转移率。经测定,平均成品率为91.5%,辛弗林平均转移率为61.2%,毛蕊花糖苷平均转移率为62.3%。结果表明无糖型聪智颗粒剂的制备工艺基本适合于工业生产。四、初步稳定性研究室温留样试验:试验温度为室温自然环境,湿度40-90%RH,分别于试验后1、2、3、6个月取样考察性状、薄层、水分、溶化性、辛弗林和毛蕊花糖苷含量及微生物限度。加速试验:试验温度40℃,湿度75%RH,分别于试验后1、2、3、6个月取样考察性状、薄层、水分、溶化性、辛弗林和毛蕊花糖苷含量及微生物限度。