褪黑素是由松果体分泌的一种多功能吲哚类激素,其分泌具有昼夜节律和季节性节律。松果体的生长和发育受到许多因素的影响,其中最主要的原因是年龄因素,在脊椎动物中松果体从出生之时起就开始分泌褪黑素,直到幼年时期达到巅峰,之后随着年龄的增长,松果体逐渐退化。褪黑素在动物繁殖过程中的作用也很重要,一方面可以通过下丘脑-垂体-性腺轴来调控生殖作用,另一方面,生殖器官内自分泌的褪黑素可直接参与到生殖过程中。目前关于褪黑素卵泡发育等生殖过程的重要调控作用已得到大量证明。在蛋鸡卵巢中存在褪黑素的受体,因此褪黑素可通过其受体直接作用于卵巢并调节性腺激素的合成和分泌,从而影响生殖功能。本试验通过对不同产蛋时期蛋鸡褪黑素及重要生殖激素-促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的含量进行测定并进行关联分析。同时,对不同产蛋时期的蛋鸡松果体发育情况和蛋品质相关指标进行统计分析,揭示褪黑素与蛋鸡产蛋性能的相关性。然后,在产蛋末期蛋鸡的饲料中添加不同浓度的褪黑素,检测各组蛋鸡体内促卵泡素、促黄体素和褪黑素含量的变化情况,再对应分析不同浓度的饲料添加褪黑素对蛋鸡蛋品质的影响,以对褪黑素与产蛋末期蛋鸡产蛋性能的关系做具体分析。根据研究内容,本课题分为两大部分。第一部分利用ELISA试剂盒检测蛋鸡血液中激素含量,再利用甲基百里香酚蓝比色法检测钙含量,并使用蛋品质测试仪对不同产蛋时期蛋品质进行检测。对不同产蛋时期蛋鸡松果体细胞进行培养,观察其大小形状并检测其合成褪黑素的能力。结果显示,不同产蛋时期蛋鸡血液中激素含量和产蛋性能具有差异性,产蛋高峰期蛋鸡血液中褪黑素含量较产蛋末期的蛋鸡高8.1%、促卵泡素含量高28.1%、促黄体素含量高32.9%,在蛋品质方面蛋壳厚度高8.2%、蛋壳强度高15.3%、蛋重增大2.3%;产蛋末期的蛋鸡松果体发育情况和细胞合成褪黑素的能力与产蛋高峰期时相比已经出现减弱,其中松果体的大小只有产蛋高峰期时的一半,细胞发育情况也较差。第二部分在产蛋末期的蛋鸡饲料中添加不同浓度的褪黑素,并根据添加褪黑素浓度的不同共设置四个组别,检测各组蛋鸡体内褪黑素、促卵泡素和促黄体素的变化和蛋品质的差异。利用表面增强拉曼光谱扫描褪黑素添加对鸡蛋成分的影响,采用RT-PCR方法检测添加褪黑素后蛋鸡体内产蛋相关基因的表达情况,分析褪黑素对蛋鸡产蛋性能的影响。结果显示,对产蛋末期蛋鸡添加不同浓度褪黑素后血液中激素含量和产蛋性能与添加前相比显著提高,其中每千克饲料中添加1mg褪黑素时增加最为显著,与对照组相比褪黑素含量增加5.3%、促黄体素含量增加46.3%、促卵泡素增加56.8%、浓蛋白高度增加了26.2%、蛋壳厚度增加4.9%、蛋壳强度增加20.1%、蛋重增加了 34.3%,说明褪黑素的合成是影响蛋鸡蛋品质的重要因素。本研究为蛋鸡产蛋性能的提高提供了理论依据,为蛋鸡产蛋高峰期的延长和褪黑素在蛋鸡生产中的应用提供理论参考,为家禽养殖的良性发展提供支持。