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全球气候变暖迫近,加剧了环境热应激对家禽生产的负面影响,表现出生产性能降低,机体生理代谢的紊乱、器官损伤以及炎症反应,给畜牧业带来巨大的经济损失,尤其是在热带和亚热带地区。因此,研究热应激对家禽生理代谢的变化和器官损伤机制以及开发天然植物提取物缓解热应激将对家禽业具有重要的意义。试验选取480只健康的雄性黄羽肉鸡(28-d-old)分别称重(平均重量为717克),随机分为5个处理组,每个组6个重复,每个重复16只鸡。其中,热中性组(TN)控制环境温度为24±2℃并饲喂基础日粮。其余4组接受热应激处理,热应激控制室温为37±2℃,8 h/d(0930-1730),其余时间控制为24±2℃,分别饲喂基础日粮以及基础日粮添加200、350、500 mg/kg白藜芦醇的日粮,分别定义为HT组、HT200组、HT350组和HT500组,试验持续14天(28日龄为试验第1天)。此外,另选取28日龄体重接近、健康的雄性黄羽肉鸡96只,随机分为两组,分别为热中性组(24℃±2℃)和热应激组(37℃±2℃,8h/d,0930-1730),每组3个重复,每个重复16只鸡,试验持续3d,用于iTRAQ蛋白组学研究,使用R语言中t-test函数计算样本间差异显著性,显著差异表达蛋白的筛选标准为:p<0.05以及(FC<0.83或FC>1.20)。主要结果如下:1热应激和白藜芦醇对黄羽肉鸡生产性能和血液生理生化指标的影响热应激降低了平均日采食量(ADFI)(P=0.013),平均日增重(ADG)(P<0.001),半净膛率、全净膛率和胸肌率(P<0.05),增加了料重比(F/G)(P=0.009)以及3d后的直肠温度(P<0.05)。日粮中添加白藜芦醇提高了ADG(P=0.001),增加了半净膛率、全净膛率和腿肌率(P<0.05),并且从3 d开始降低了(P<0.05)直肠温度。此外,热应激提高了(P<0.05)血清COR、ACTH、TC、TG、UA、MDA的含量和AST、ALT、LDH的活性,降低了(P<0.05)T3、GLU、TP、GSH含量和ALP、T-SOD、CAT、GSH-Px的活性以及T3/T4比值。日粮中添加350和500mg/kg白藜芦醇降低了(P<0.05)血清COR、ACTH、TC、TG、UA、MDA的含量和ALT、AST、LDH的活性,增加了(P<0.05)血清T3、TP、GSH的水平和ALP、T-SOD、CAT、GSH-Px的活性以及T3/T4比值,但是在不同的时间上会出现一定的波动。结果表明,添加白藜芦醇可以通过积极调节血清代谢参数,减轻热应激下肉鸡组织氧化损伤,提高肉鸡生长性能。2热应激和白藜芦醇对黄羽肉鸡免疫器官指数、形态及血清抗体补体水平的影响热应激显著降低了(P<0.05)胸腺、脾脏和法氏囊的器官指数,从组织形态上造成了脾脏、胸腺和法氏囊不同程度的损伤。血清补体C3、C4和抗体IgG、IgM水平在不同时间热应激后都出现了显著下降或有下降的趋势。日粮中添加350或500mg/kg白藜芦醇能够有效的提高胸腺、脾脏和法氏囊的器官指数,缓解免疫器官损伤症状,增加血清C3、C4和IgG、IgM的含量,改善机体免疫功能。3白藜芦醇缓解热应激黄羽肉鸡肠道屏障功能损伤热应激d3和d 14,明显降低了(P<0.05)黄羽肉鸡空肠、回肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值(V/C),空肠粘膜mucin-2、分泌型免疫球蛋白(sIgA)、claudin-1、zona occludens-1的mRNA的表达,以及血清IFN-γ水平;提高了(P<0.05)空肠、回肠隐窝深度,空肠粘膜HSP70、HSP90、NF-κB、mucin-4、claudin-2 m RNA的表达,以及血清内毒素、IL-1β、IL-4、IL-6和TNF-α的水平,但是对d14 claudin-1 m RNA的表达和d3血清TNF-α影响不大(P>0.05)。日粮中添加500mg/kg白藜芦醇降低了(P<0.05)隐窝深度(d3空肠、回肠d14),空肠粘膜HSP70、HSP90、NF-κB、mucin-4、claudin-2 mRNA的表达,内毒素、IL-1β、IL-4、IL-6和TNF-α的水平,并提高了(P<0.05)空肠、回肠绒毛高度、V/C,mucin-2、sIgA、claudin-1、zono occludens-1 mRNA的表达和血清IFN-γ的水平,但是在d3和d14的效果有一定的浮动。结果表明,白藜芦醇有效缓解热应激对肠道屏障功能的副作用,通过恢复绒毛-隐窝结构,改变肠道的HSPs、mucins、sIgA和紧密连接相关基因mRNA表达,抑制炎症细胞因子的分泌来发挥功效。4 i TRAQ蛋白组学筛选热应激黄羽肉鸡脾脏差异表达蛋白及生物信息学分析i TRAQ蛋白组学鉴定到热应激3d后黄羽肉鸡脾脏差异蛋白62个,其中包括上调蛋白6个,下调蛋白56个。GO分析表明,上调差异蛋白显著富集在细胞组分类细胞蛋白功能。其次,下调蛋白显著富集在生物过程,如细胞的过程、细胞组分,包括细胞组成部分、膜组成部分、细胞器以及细胞器组成部分。结合KEGG分析,热应激下黄羽肉鸡可能通过以下途径来应对:1)通过铁离子诱导的氧化途径导致细胞铁死亡;2)通过P53信号通路,使细胞出现细胞周期阻滞,减少核糖体及相关蛋白的合成;3)上调HSP70的表达,调控细胞固有免疫模式识别受体表达及诱导炎症反应。5基于蛋白组学结果探讨白藜芦醇对热应激黄羽肉鸡脾脏固有免疫的调控作用14d热应激引起黄羽肉鸡脾脏固有免疫的过度活化,HSP70,TLR1、TLR4,TLR5,MyD88,NOD1,Dectin-1和TAK1 mRNA表达显著提高(P<0.05),但是TLR2 mRNA表达降低(P<0.05);激活了NF-κB、MAPK和PI3K/AKT信号通路,上调了IL-1β、IL-4、IL-6和TNF-αmRNA表达,但是抑制了IFN-γmRNA表达。日粮中添加500 mg/kg白藜芦醇下调了热应激黄羽肉鸡脾脏(P<0.05)HSP70、TLR4、TLR5、NOD1、Dectin-1和TAK1 mRNA表达,抑制NF-κB、MAPK和PI3K/AKT信号通路通过下调(P<0.05)p65和p38 MAPK的过表达以及p65、ERK1/2、c-JNK和AKT的磷酸化水平,同时降低了(P<0.05)细胞因子IL-1、IL-4、IL-6和TNF-αmRNA的表达。因此,白藜芦醇能够有效抑制热应激黄羽肉鸡脾脏固有免疫模式识别受体过度活化,可以通过NF-κB、MAPK和PI3K/AKT信号通路抑制炎症反应,缓解热应激脾脏损伤。综上所述,热应激造成了黄羽肉鸡多项血液生化指标的异常,破坏了肠道屏障功能,诱导了炎症反应,降低了生产性能。白藜芦醇能够有效改善机体代谢,提高肠道紧密连接,抑制脾脏固有免疫模式识别受体过度活化,并通过NF-κB、MAPK和PI3K/AKT信号通路抑制炎症反应,缓解热应激脾脏损伤,提高生产性能。