人纤溶酶原kringle1-3功能区基因的克隆、原核表达及产物纯化和生物活性鉴定

来源 :广州医学院 广州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sflljlove
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目的通过构建人纤溶酶原kringle1-3功能区基因非融合原核表达载体,诱导表达并纯化具有生物活性的kringle1-3蛋白,为该蛋白在病理性血管疾病方面的进一步研究提供材料.结论:1.利用PCR技术构建了重组克隆载体pUC/K1-3,并经PCR与测序证明.2.成功构建了非融合原核表达载体pET/K1-3系统,并经PCR、双酶切与诱导表达所证明.3.经IPTG诱导,目的基因获得高效表达,且为可溶性蛋白.4.利用L-赖氨酸Sepharose 4B亲和层析株成功纯化了kringle1-3蛋白.5.所纯化的kringle1-3蛋白具有特异抑制血管内皮细胞的生物学活性,可为该蛋白在病理性血管疾病方面的应用研究提供材料.
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