蝴蝶兰是具有重要观赏价值和经济价值的花卉，其花色秀丽、色泽丰富、观赏期长，是当今世界上最受欢迎的兰花种类之一，具有广阔的市场前景。随着市场的扩大，迫切需要更多适合市场的新品种。转基因育种技术可以对植物的目标性状进行定向变异和定向选择，将成为改变花形花色、抗病、耐寒、香味等性状的一种有利工具。本研究以蝴蝶兰试管苗叶片为材料，研究影响类原球茎诱导、增殖和分化的因素，以类原球茎为受体，研究影响农杆菌遗传转化效率的因素。主要研究结果如下： 1.以蝴蝶兰株系04-H-31-Q3l的离体叶片为材料，研究影响类原球茎诱导、增殖与分化的因素。结果表明，细胞分裂素对于诱导蝴蝶兰叶片产生类原球茎起着主要作用，以TDZ 1 mg/L+6-BA 5 mg/L+NAA 1 mg/L的外源激素组合效果最佳。pH、切块大小、培养方式和外源激素对于类原球茎增殖和生长有显著影响。在pH为5.8的固体培养基上，0.5 cm×0.5 cm大小的类原球茎切块最适合增殖；最合适增殖培养的外源激素组合是6-BA 1.0 mg/L+n.AA 0.2 mg/L，其绝对生长速率达到272.52％：固体培养法比滤纸桥法更适合类原球茎增殖。绘制了类原球茎的增殖曲线。外源激素对类原球茎分化有明显影响，在不含外源激素的培养基上分化率最高，为80.75％；PVP、柠檬酸对蝴蝶兰类原球茎分化都有显著促进作用，而活性炭对PLB的分化有抑制作用；土豆促进蝴蝶兰小苗生长，使小苗生长健壮，且整齐度高。潮霉素对类原球茎增殖有明显影响，5～10 mg/L潮霉素适合于转化体的筛选。 2.以蝴蝶兰株系04-H-31-Q31的类原球茎为受体，研究了影响农杆菌转化效率的因素。结果发现，预培养时间、乙酰丁香酮浓度、菌液的浓度、侵染时间、类原球茎的创伤方式和共培养时间对转化效率有明显影响。当类原球茎预培养时间为20～30 d、侵染的菌液与共培养基中加入200 μmol·L-1乙酰丁香酮、工程菌液OD600值为0.2、侵染时间为25 min、采用划伤法对类原球茎进行创伤、共培养时间为5 d时，遗传转化效率高，最高的瞬时表达率为58.30％。 3.以类原球茎为受体，采用上述转化参数对蝴蝶兰株系04-H-31-Q31和05-PH-7-13进行遗传转化。经5 mg/L潮霉素筛选，04-H-31-Q3l总共获得126株抗性苗，经过PCR检测得到5株转基因植株，转化率为3.97％；经10 mg/L潮霉素筛选，新株系05-PH-13-7总共得到49株抗性苗，经检测得到6株转化苗，转化率为12.20％。 通过上述研究，建立了以类原球茎为受体的蝴蝶兰遗传转化受体系统和农杆菌介导的遗传转化技术体系，为今后利用转基因方法进行蝴蝶兰育种奠定了坚实基础。