叶酸对人宫颈癌细胞体外抑制的研究

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目的:探讨叶酸对人宫颈癌Hela细胞的作用。方法:体外培养Hela细胞,用不同浓度叶酸分别处理24~72小时后,①噻唑蓝(MTT)法检测细胞的生长活性②流式细胞术检测叶酸持续作用于Hela细胞48h后细胞的凋亡率;③RT-PCR技术检测Hela细胞C-myc、P16及P53基因mRNA的表达水平;④免疫印迹(Western blotting)技术检测C-myc、P16及P53蛋白的表达情况。结果:①干预24h后,750、1875 nmol/L叶酸组对Hela细胞抑制率显著升高(P<0.05);而干预48h和72h后,375、750、1875 nmol/L叶酸组,其对Hela细胞的抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),但仍低于顺铂组(P<0.05),同时随干预时间的延长和剂量的增加,Hela细胞的抑制率呈上升趋势;②叶酸干预人宫颈癌Hela细胞48小时后,流式细胞仪检测表明,Hela细胞出现明显的凋亡现象,且细胞凋亡率随叶酸浓度的增加而明显上升,存在剂量效应关系;③RT-PCR检测显示, P16基因mRNA的表达水平在18 nmol/L叶酸组与对照组比较无统计学差异(P>0.05),C-myc和P53基因mRNA的表达水平各叶酸组与对照组比较有统计学差异(P<0.05);④Western blotting检测提示,各叶酸干预组与对照组比较C-myc、P16及P53蛋白的表达均存在统计学差异(P<0.05),且有剂量效应关系。结论:①叶酸在体外对Hela细胞生长具有一定的抑制作用,且有剂量反应关系。②叶酸诱导Hela细胞的凋亡,其机制可能是通过下调C-myc基因的表达和上调P16、P53基因的表达来实现的。
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