随着中药产业快速发展,中药质量检测越来越受到重视。本文在质量源于设计理念的指导下,以党参和黄芪水提液为对象,研发了糖类成分定量检测方法;以三叶糖脂清汤剂为对象,研发了定量指纹图谱方法;基于纸基芯片技术,研发了丹参水提液抑制黄嘌呤氧化酶活性的检测方法。主要内容包括:1.基于中药体系特点提出了分析质量源于设计新流程,并将其用于研发党参和黄芪水提液中糖类成分测定的HPLC-ELSD方法。采用二水平析因实验确定党参样品葡萄糖峰的保留时间及信噪比、黄芪样品蔗糖峰的保留时间为关键方法评价指标(CMAs)。提出了加权决定系数法,并以此确定关键方法参数(CMPs)为梯度初始有机相比例、梯度结束有机相比例、流速和柱温,通过多元回归建立CMAs与CMPs的定量模型,以模拟实验测定误差法计算基于概率的设计空间并验证,验证结果表明模型预测性能良好,设计空间可靠。经过方法学验证,所建立的分析方法能适用于党参水提液中果糖、葡萄糖以及黄芪水提液中果糖、蔗糖的含量测定。2.采用HPLC-UV建立三叶糖脂清汤剂的定量指纹图谱。确定需要优化的方法参数为柱温、流速和流动相梯度条件,通过确定性筛选设计确定CMAs为峰个数、共有峰面积占总峰面积的百分比和最后一个峰的保留时间,采用逐步回归法建立CMAs与方法参数的定量模型,以模拟实验测定误差法计算设计空间并成功验证。优化后的方法测定绿原酸、芍药苷、芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和丹酚酸B等6种成分,指纹图谱共有峰19个,共有峰面积占0.96。对优化后的方法进行指纹图谱和定量检测的方法学考察,结果表明进样精密度、方法重复性和样品稳定性均符合要求,且方法具有良好线性和准确性。对10批汤剂的指纹图谱进行相似度评价,结果均大于0.90,证明该指纹图谱方法适用于三叶糖脂清汤剂的质量一致性检测。3.建立丹参提取液对黄嘌呤氧化酶抑制作用的纸基芯片检测方法。利用3D打印聚己内酯的改性滤纸,通过剪裁和折叠构建双层纸基芯片,并将酶、底物和显色试剂预先加在反应区。比较了不同稳定剂,发现10%甘油溶液能显著提升酶的稳定性。比较不同浓度别嘌醇作用下所得各颜色分量数值,确定颜色分量G为检测指标,以其数值大小作为CMA。通过确定性筛选设计建立CMA与多个方法参数的定量模型,计算获得设计空间并进行了验证。确定较优检测条件后将其用于检测丹参提取液对黄嘌呤氧化酶的抑制活性,并将检测结果与96孔板法比较,统计学检验结果证明两种方法之间无显著差异。自行设计并3D打印制成了小型检测盒和显色反应支撑台等,使该方法具有用于现场检测的潜力。