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茶用菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)是菊科多年生宿根草本植物,因其独特的风味口感和养生功效深受人们喜爱。茶用菊在我国的栽培面积逐年扩大,但其无性繁殖方式以及土壤的连作导致病毒病害严重,出现花朵品质下降、种性退化、产量降低等现象,经济效益下降,严重制约了茶用菊产业的发展。本文在茶用菊感染病毒情况调查的基础上,对两种感染病毒病害严重的茶用菊‘七月白’、‘福白菊’进行了病毒检测确定其感染病毒的种类,并对其进行4℃低温处理结合利巴韦林脱毒,结合SARP引物对脱毒苗的遗传稳定性进行分析,建立了茶用菊病毒脱除的体系,为茶用菊脱毒苗的推广和茶用菊产业的发展奠定了理论依据。主要研究结果如下:1.以南京农业大学湖熟菊花基地保存的39种茶用菊种质资源为材料,利用巢式PCR的方法对这些茶用菊感染病毒或类病毒的情况进行调查,确定了在茶用菊中感染较为普遍的四种优势病毒和类病毒,分别为CVB、TAV、CSVd和CChMVd。其中,在这39种茶用菊中,感染率最高的为CSVd达到100%,其次是TAV为89.7%,CVB和CChMVd的感染率均为66.7%。2.对病毒感染情况较严重的‘七月白’、‘福白菊’进行菊科常见8种病毒的检测,通过巢式PCR以及进一步的BLAST分析比对,确定‘七月白’感染了 CVB、TAV、CSVd三种病毒,而‘福白菊’则感染了 CVB、CSVd两种病毒。3.设置5组不同浓度6-BA和NAA的MS培养基,每种浓度培养基各接种15个‘七月白’和‘福白菊’的茎尖分生组织(重复2次),筛选到最适合茎尖分生组织生长的激素浓度,‘七月白’和‘福白菊’均在6-BA(1mg/L)和NAA(0.1mg/L)的MS培养基中生长最为健壮且出愈率最高。4.利用文献中报道的方法加以改良,对‘七月白’和‘福白菊’进行4℃低温处理结合利巴韦林脱毒,后期对脱毒苗进行脱毒效果检测,‘七月白’共获得12棵脱毒苗,‘福白菊’共获得8棵脱毒苗,并对脱毒苗进行大量扩繁。5.在DNA水平上,利用筛选到的16对SRAP引物组合对脱毒苗以及常规无菌组培苗进行遗传稳定性分析,结果表明脱毒苗与无菌组培苗之间未检测到明显的遗传位点差异,结果表明4℃低温处理结合利巴韦林脱毒没有对‘七月白’、‘福白菊’产生遗传变异影响,脱毒苗均能保持‘七月白’和‘福白菊’的遗传稳定性。