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目的应用siRNA干扰技术下调人肝细胞肝癌细胞株Hep3B中肝肠钙粘连蛋白(LI-cadherin,CDHl7)的表达,研究LI-cadherin对人肝癌细胞生长的影响,并初步探讨其机制。方法1按Lipofectamine脂质体转染法,将si RNA转染入Hep3B中,使用(G418液筛选稳定转染的Hep3B-LI-cadherin-SiRNA细胞株,并利用荧光倒置显微镜观察其转染效率。2用Western Bloting(蛋白质印迹)方法检测各组细胞中Ll-cadherin蛋白及细胞周期相关蛋白CyclinDl表达量变化情况。3用MTT(四唑盐比色法)法检测LIcadherin对肝癌细胞生长的作用并绘制细胞生长曲线；4运用Pl/Rnase染色-流式细胞分析法检测各组细胞周期分布；结果1利用倒置荧光显微镜观察,发现SiRNA转染组细胞中大部分可见明显的绿色荧光,证实已成功转染。并且通过计算得出视野内发出荧光的细胞占全部细胞的85%,即转染效率为85%,符合本实验的基本条件。2转染后普通培养72小时,通过Western-blotting检测发现空白对照组、空质粒转染组的Ll-cadherin的蛋白表达率无明显差异(P>0.05), SiRNA转染组LI-cadherin的蛋白的表达均低于空白质粒转染组、空白非转染对照组(P<0.05),表明LI-cadherin抑制有效；SiRNA转染组与空白对照组、空质粒转染组相比,Cyclin Dl蛋白表达明显升高。3通过MTT法分别检测三组细胞6个时间点,发现Hep3B-LI-cadherin-SiRNA组细胞生长速度在12h、24h和36h分别与空白非转染对照组、空白质粒转染组相比较无统计学意义(P>0.05),而在48h、72h和96h,则明显快于空白对照组和空质粒转染组,且差异有统计学意义(P<0.05),但空质粒转染组和空白非转染对照组之间比较无统计学意义(P>0.05)。4SiRNA转染组细胞和空白对照组、空质粒转染组相比,S期及G2/M期含量百分比明显增多,G0/Gl期含量百分比明显减少,细胞增殖指数(PI)较高,转染组与其他两组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)；空白对照组和空质粒转染组相比各期细胞百分比及PI值变化不大,且差异无统计学意义(P>0.05)。结论1、成功转染并构建了Li-cadherin-SiRNA-Hep3B肝癌细胞株。2、转染Li-cadherin-SiRNA成功的Hep3B肝癌细胞株的Ll-cadherin表达降低,而CyclinDl的表达增加。3、Ll-cadherin可以抑制肝癌细胞株Hep3B的生长,推测其可能的机制是通过下调细胞周期蛋白Cyclin Dll勺表达水平和影响细胞周期各期百分含量的分布。