益胃扶脾疏肝法对雌性CFS模型大鼠中枢氨基酸递质调控研究

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目的:本课题继承传统名方益胃汤(《温病条辨》)用药,以益胃扶脾疏肝为法,通过对初老雌性大鼠慢性疲劳综合征模型动物中枢氨基酸递质及相关指标的检测,探讨女性围绝经期慢性疲劳综合征的发生机制,为防治围绝经期慢性疲劳综合征,提高女性围绝经期生活质量,提供一个全新的治疗方向和安全有效方药,并具有佐证中医经典理论的意义。方法:选择10~12月龄雌性SD大鼠,采用巴氏染色法观察实验大鼠阴道脱落细胞4个动情周期涂片变化,将表现为动情期延长的大鼠纳为初老大鼠模型。将实验动物随机分成6组:正常空白组、空白对照组、益胃汤高、中、低剂量组和氟西汀组。经过造模、灌胃30天后开始模型验证实验,实验结束后颈椎处死大鼠,迅速取海马置于液氮中保存,用氨基酸自动分析仪测定实验动物海马中氨基酸的含量,以检测该方对海马氨基酸水平的调节作用;用免疫组化法检测实验动物海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA-R)的含量,以了解该方对兴奋性氨基酸与NMDA-R相互关系的影响;免疫组化法检测环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)以探讨该方对氨基酸递质传导通路的作用机制。结果:与空白对照组比较,在一般情况的调控方面:以益胃扶脾疏肝之中药益胃汤具有显著的抗疲劳、增强学习记忆能力、改善探究行为和抑郁情绪的作用。在海马氨基酸水平的调控方面:益胃汤能提高海马兴奋性氨基酸(EAA)和抑制性氨基酸(IAA)之间的比值即谷氨酸(Glu)/甘氨酸(Gly)和天冬氨酸(Asp)/Gly,说明益胃汤可以通过调节EAA和IAA水平和比例,增强其抗应激反应的能力,并在一定程度上增强机体的抗氧化能力,从而改善细胞的神经功能,达到消除疲劳增进学习、记忆能力的作用。在氨基酸递质信号通路传导方面:益胃汤可以通过升高NMDA-R水平,增强Glu的学习、记忆作用,对抗慢性束缚加复合刺激所致海马学习、记忆功能下降,从而促进疲劳状态的恢复;益胃汤可以提高海马cAMP水平和cAMP/cGMP比值,提示益胃汤可以通过调节两者的比例,进一步调控中枢氨基酸递质传导通路,从而达到提高学习、记忆能力,有利于疲劳的恢复。结论:益阳明之津,补太阴之气,疏畅肝之郁的中药益胃汤通过调节海马氨基酸递质代谢和信号传导通路,增强机体的抗氧化能力,对抗慢性束缚加复合刺激所致学习、记忆功能下降,缓解“慢性疲劳”大鼠躯体及心理的应激状态,促进疲劳状态的恢复。
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