论文部分内容阅读
氮肥的吸收和同化对于植物的发育和成长非常重要。本研究通过对不同株藤稔葡萄分别喷施尿素、硝酸铵、硫酸铵、氯化铵、硝酸钠五种分析纯肥料,先是测定葡萄枝叶生理性状,利用萃取法测定处理叶片叶绿素含量,对净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)和胞间C02浓度(Ci)等光合特性参数变化情况进行测定,后利用VitisEST数据库中EST序列片段结合RT-PCR方法克隆与氮代谢相关的5个酶的编码基因：硝酸盐还原酶(NR),亚硝酸还原酶(NiR),谷氨酰胺合成酶(GS),谷氨酸脱氢酶(GDH)和天冬酰胺合成酶(AS),运用荧光定量PCR法研究了上述各基因在葡萄叶面不同处理后的表达情况。旨在为葡萄栽培管理以及科学施肥提供一定理论依据,对氮肥的合理应用具有一定指导意义。具体主要研究结果如下：1.本研究选取3个位于固定节位的新梢于施肥前和施肥后15d测量其新梢长和成熟叶的长与宽,计算新梢增长率和叶片增长率以及叶面积。使用游标卡尺测量果实纵横径,通过电子天平称量单个果实质量。结果表明各处理均能在不同程度上提高葡萄新梢增长率,尿素和硝酸铵处理极大地促进了叶片的生长。对果实影响最大的是硫酸铵和尿素,氯化铵对果实大小影响相对较小。利用英国PP-System公司的CIRAS-1光合测定系统,采用开放式气路测定净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)和胞间CO2浓度(Ci)等参数。表明尿素处理对蒸腾速率各时段均有影响且最大,硝酸铵、硫酸铵以及氯化铵对一天中后半时段的蒸腾速率有影响；尿素处理对气孔导度的影响最大,这与蒸腾速率的处理效果一致：各处理Ci的变化趋势并不完全一致,但各处理多数时段的Ci值变大,促进了光合作用的进行；净光合速率在一天中的变化呈“双峰”型曲线,各处理对于“午休”时段的净光合速率影响不明确,对一天中其他时段提高了净光合速率,其中尿素的影响效果最为显著。2.运用荧光定量PCR技术对5个葡萄氮代谢基因VvGHD (JF796045)、VvNiR (JF796046)、VvNR (JF796047)、VvGS (JF796048)和VvAS (JF796049)在施用不同种类氮肥后的表达情况进行了分析。结果表明,5个基因在葡萄叶面喷施不同种类氮肥后不同时间段的表达量存在显著差异,适宜浓度氮肥对基因诱导效果极显著且时间较长,其中以尿素处理的效果最为显著,硝酸铵和硫酸铵处理诱导基因表达的时段较为集中,氯化铵和硝酸钠处理对各基因表达的诱导时段较为扩散且效果显著。