研究目的:1.目前国内尚无成型的大鼠常温携氧灌注模型,限制了常温机械灌注的基础研究,本次实验拟建立大鼠常温携氧机械灌注模型,实现大鼠NMP灌注。2.探讨常温机械灌注灌注液中加入EGCG改善脂肪变大于30%的肝脏的可行性。研究方法:1.建立大鼠常温携氧机械灌注系统。由蠕动泵,氧合器,储液槽,除泡器,温度检测器,压力传感器,肝槽,胆汁收集器组成。通过对大鼠肝脏的灌注,评估该系统的在大鼠携氧机械灌注中的应用。2.建立脂肪肝大鼠模型,将脂肪肝大鼠随机分为:EGCG灌注组(NMP-Y组)包括:5mM,10mM,20mM,30mM剂量组,灌注液对照组(NMP组),冷保存组(SCS组)。脂肪肝模型建立成功后取大鼠肝脏,NMP-Y组及NMP组获取大鼠肝脏后分别应用含有EGCG的灌注及不含有EGCG的灌注液对肝脏进行保存3个小时,SCS组肝脏使用UW保存液保存3小时,灌注过程中分别取10min,20min,30min,40min,50min,60min,90min,120min,3h 灌注液,灌注液经过离心(2000rpm,4℃,5 分钟)后取上清液放置-80℃保存。肝脏组织标本分别放置福尔马林、冰冻切片保存液。灌注结束后检验灌注液中ALT,AST,TG,LDH的含量。肝脏组织进行组织切片与HE染色,观察脂肪肝大鼠肝组织形态,用油红染色法检测肝组织脂肪化。通过称重胆汁引流管灌注前后重量改变的方式计算胆汁产生量。研究结果:本研究成功构建了大鼠肝脏常温携氧机械灌注系统,该系统可维持3小时以上的大鼠肝脏的常温携氧机械灌注,经该系统灌注的肝脏可以分泌胆汁,肝脏质地柔软,肝脏质量优于低温冷保存。EGCG灌注组灌注液中肝脏酶学变化显著低于对照组,甘油三酯变化显著高于对照组,HE染色分析肝脏组织无明显结构破坏。通过油红染色可观察到EGCG灌注组10mM剂量组肝脏脂肪变相比对照组有显著改善。结论:本研究成功建立了大鼠肝脏常温携氧机械灌注系统。将EGCG应用于肝脏常温携氧机械灌注液可以显著改善脂肪肝脏脂肪变程度。