【研究背景】　　妊娠期高血压疾病（Hypertensivedisorderscomplicatingpregnancy，HDCP）是妊娠特有疾病，在全球的发病率是3％-4%，在西方国家，其平均发病率约为5%-10%，在部分发展中国家和地区的发病率更高，在中国的发病率9.4%-10.4%，其中2%-7%为子痫前期（Pre-eclampsia，PE），PE主要特点为20周以后出现高血压及尿蛋白，是导致医源性早产和孕产妇死亡的主要原因之一。全世界每年约有800万妊娠妇女发生子痫前期，子痫前期患者，发生胎盘早剥、凝血功能障碍、脑血管意外、呼吸窘迫综合征以及肝肾功能损伤等风险大大增加。在美国，子痫前期占孕产妇死亡的18%，在我国，子痫前期是导致孕产妇死亡的第二个主要因素。子痫前期对胎儿的生长发育也构成了严重威胁，约25%的新生儿死亡与子痫前期相关。目前除终止妊娠，尚无有效缓解症状的方式。妊娠期高血压疾病严重并发症与母婴的预后有密切的关系，通过降低妊娠期高血压疾病严重并发症的发生，这对减少孕产妇及围产儿的死亡率，改善妊娠结局起重要作用。　　妊娠期高血压疾病的发病原因及发病机制目前尚未完全阐明，经过国内外学者们的不断努力，妊娠期高血压疾病的病因学研究从临床流行病学研究、建立动物模型、对组织细胞学的观察、直至如今分子生物水平的研究。妊娠期高血压疾病病因相关学说主要有炎症免疫过度激活、子宫螺旋小动脉重铸不足、血管内皮细胞受损、遗传因素、胰岛素抵抗及营养缺乏。迄今为止，妊娠期高血压疾病的病因及发病机制尚不能用任何单一的理论进行全面诠释。如何对妊娠期高血压疾病进行早期预测及临床预警，如何对妊娠期高血压疾病及其并发症进行及时诊治，权衡母婴双方利弊，减少孕产妇死亡率，提高围产儿存活率，一直是产科邻域研究的重要课题。　　子痫前期的发生是遗传因素和环境因素综合作用的结果，在个体具有遗传易感性的基础上，环境有害因素作用会导致疾病发生。易感基因的特点是变异的基因本身并不能直接导致疾病的发生，而只造成机体患病的潜在危险性增加，当有外界有害因素介入时，即会致疾。不同的个体和群体对不同疾病的易感性、抵抗性以及其他生物学效应（如对药物的敏感性）存在差异，人类基因组核苷酸序列的变异是这种差异的遗传学基础，因此，子痫前期在不同种族的患病率存在差异。　　单核苷酸多态性（SNP）是指在基因组上单个核苷酸的变异，包括置换、缺失、颠换和插入。SNP作为一种遗传标记，在基因组中具有高密度和高保守的特点。大多数SNP位于基因组的非编码区，即使位于基因组编码区也不影响翻译后的氨基酸，这些SNP对个体的表现型都不会产生影响，只有少数SNP位于基因表达调控区或者蛋白编码区中，能够导致基因转录活性或蛋白结构功能的改变，因而引起个体对特定环境或病因的易感性。SNP作为反映个体遗传易感性差异的重要因素，在某一疾病人群和正常对照人群中进行SNP对比研究，可以确定SNP位点与该疾病的风险关系，因而可用于疾病遗传易感性的研究。　　由于不同地域和种族间存在遗传差异，为了解深圳地区汉族妇女子痫前期发病的遗传基础，根据以前的研究，本研究选取7个PE相关基因的9个SNP位点（FⅤ基因rs6025和rs6020位点，MTHFR基因rs1801133位点，FⅡ基因rs1799963位点，SERPINE1基因rs1799889位点，CTLA4基因rs231775位点，IL-10基因rs1800896位点,TNF-α基因rs1800629和rs1799724位点），所有的基因都参与凝固、纤维蛋白溶解和炎症，探讨基因多态性与子痫前期的关系。　　【目的】　　本研究通过对2011年1月至2014年12月在深圳市分娩的妊娠期高血压疾病孕产妇进行临床流行病学分析，探讨妊娠期高血压疾病的发病情况及对孕产妇及围产儿的影响；同时通过对子痫前期患者的7个子痫前期相关基因的9个SNP位点（FⅤ基因rs6025和rs6020位点，MTHFR基因rs1801133位点，FⅡ基因rs1799963位点，SERPINE1基因rs1799889位点，CTLA4基因rs231775位点，IL-10基因rs1800896位点,TNF-α基因rs1800629和rs1799724位点）分析，探讨这些参与凝血、纤维蛋白溶解和炎症的基因位点与子痫前期易感性的关系。　　【材料与方法】　　1.研究对象　　对2011年1月至2014年12月在深圳市分娩的妊娠期高血压疾病孕产妇病例14318例进行回顾性分析，同时选取2014年7月至2015年5月期间，在深圳市妇幼保健院产科住院分娩的的孕妇中，根据病史、临床表现及生化检查的结果，选取117例子痫前期患者（轻度子痫前期11例、重度子痫前期106例）为子痫前期组，收集同期住院分娩的正常孕妇286例为对照组。子痫前期组年龄范围为20~42，平均年龄为31.43±5.18；平均孕周为34.18±3.55。对照组年龄范围为16~40，平均年龄为28.86±3.89；平均孕周为39.26±1.19。　　2.研究方法　　（1）对孕妇的发病情况、基本情况、母儿并发症、分娩方式等临床资料进行统计学分析。　　（2）研究对象入院后，抽取肘静脉血液2ml，注入EDTA抗凝真空采血管，标注病人姓名，住院号，采集日期，保存于-80℃冰箱备用。使用QiagenDNA提取试剂盒提取DNA，采用PCR扩增目的条带，使用多重SNaPshot基因分型技术，送中国深圳优谨康生物科技有限公司测序，使用软件查看SNP位点并用统计学软件进行数据分析。　　3.统计学方法　　用Excel软件及SPSS17.0对数据进行处理及分析。计数资料的各组间比较采用卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。正态分布检验方法采用K-S检验法（Kolmogorov-SmirnovTest），符合正态分布的计量资料比较采用方差分析，结果的表达方式用均数±标准差（x±s）表示，计数资料以频数（百分数）表示。两样本均数的比较采用两独立样本的t检验，多组均数间两两比较采用单因素方差分析，经过方差齐性检验，方差齐性的选用LAD法；方差不齐的选用Welch法。使用拟合优度卡方检验对基因型分布进行Hardy-Weinberg平衡定律分　　析，组间基因型和等位基因频率的比较采用R×C表卡方检验，并用非条件logistic回归来计算相关值（OR）及95%可信区间（CI）。以α=0.05为检验水准，P<0.05为差异有统计学意义。　　【结果】　　1.2011年1月至2014年12月，在深圳市分娩的815383例孕产妇中，符合妊娠期高血压疾病诊断标准共14318例，妊娠期高血压疾病总发生率1.76%。妊娠期高血压疾病孕妇的发病孕周有提前趋势，分娩方式以剖宫产为主，初产妇与经产妇构成比差异有统计学意义，孕妇的年龄差异无统计学意义，流动人口所占比例呈下降趋势。妊娠期高血压疾病各组严重并发症按发生率由高到低依次是：产后出血，胎盘早剥，弥散性血管内凝血（DIC），急性心功能衰竭，肾功能衰竭，HELLP综合征，脑血管意外。妊娠期高血压疾病围产儿结局包括：早产、死胎、新生儿死亡、胎儿窘迫、胎儿生长受限及新生儿窒息。　　2.在9个SNP位点中3个SNP位点（rs6025，rs1799963，rs1799889）基因型分布不符合哈迪-温伯格（Hardy-Weinbergequilibrium）遗传平衡定律，在后续分析中排除。　　2.1FⅤ基因rs6020位点多态性在子痫前期和对照组间的比较　　子痫前期组孕妇的rs6020对应基因型为AA型、GG型、GA型，基因型频率分别为47.86%、11.11%、41.03%；对照组基因型频率分别为39.86%、12.59%、47.55%，分布无统计学差异（P=0.336）。子痫前期组孕妇rs6020等位基因频率G为31.62%，A为68.38%，对照组等位基因频率G为36.36%，A为63.64%，两组间差异无统计学意义（P=0.200）。　　2.2MTHFR基因rs180113位点多态性在子痫前期和对照组间的比较　　子痫前期组孕妇的rs180113对应基因型为GG型、AA型、GA型，基因型频率分别为39.32%、15.38%、45.3%；对照组基因型频率分别为42.66%、11.54%、45.8%，分布无统计学差异（P=0.549）。子痫前期组孕妇rs180113等位基因频率A为38.03%，G为61.97%，对照组等位基因频率A为34.41%，G为65.59%，两组间差异无统计学意义（P=0.333）。　　2.3CTLA4基因rs231775位点多态性在子痫前期和对照组间的比较　　子痫前期组孕妇的rs231775对应基因型为CC型、TT型、CT型，基因型频率分别为41.03%、9.4%、49.57%；对照组基因型频率分别为41.61%、11.89%、46.5%，分布无统计学差异（P=0.729）。子痫前期组孕妇rs231775等位基因频率T为34.19%，C为65.81%，对照组等位基因频率T为35.14%，C为64.86%，两组间差异无统计学意义（P=0.797）。　　2.4IL-10基因rs1800896位点多态性在子痫前期和对照组间的比较　　子痫前期组孕妇的rs1800896对应基因型为GG型、AA型、GA型，基因型频率分别为1.71%、77.78%、20.51%；对照组基因型频率分别为2.1%、86.71%、11.19%，分布有统计学差异（P=0.049）。子痫前期组孕妇rs1800896等位基因频率G为11.97%，A为88.21%，对照组等位基因频率G为7.69%，A为92.31%，两组间差异无统计学意义（P=0.054）。　　2.5TNF-α基因SNPs位点多态性在子痫前期和对照组间的比较　　子痫前期组孕妇的rs1800629对应基因型为AA型、GG型、GA型，基因型频率分别为0、92.94%、7.76%；对照组基因型频率分别为1.4%、82.17%、16.43%分布有统计学差异（P=0.029）。子痫前期组孕妇rs1800629等位基因频率A为3.88%，G为96.12%，对照组等位基因频率A为9.62%，G为90.38%，两组间差异有统计学意义（P=0.006）。　　子痫前期组孕妇的rs1799724对应基因型为TT型、CC型、TC型，基因型频率分别为2.59%、54.31%、43.10%；对照组基因型频率分别为1.17%、80.08%、18.75%，分布有统计学差异（P=0.003）。子痫前期组孕妇rs1799724等位基因频率T为24.14%，C为75.85%，对照组等位基因频率T为10.55%，C为89.45%，两组间差异有统计学意义（P=0.001）。　　2.6SNP位点基因型分布与子痫前期发病风险相关性　　2.6.1IL-10和TNF-α基因3个多态性位点与子痫前期的单因素分析　　rs1800896位点3种基因型，GA型基因型在病例组中的分布频率频率明显高于对照组（P=0.015,OR=0.49,95%CI:0.28-0.88），GG型基因型的分布频率频率差异无统计学意义（P=0.907），G等位基因在病例组中的频率明显高于对照组（P=0.026,OR=1.54,95%CI:1.09-1.99）。　　rs1800629位点3种基因型，AA型基因型在病例组中的分布频率频率明显低于对照组（P=0.029,OR=0,95%CI:0），A等位基因在病例组中的频率明显低于对照组（P=0.010,OR=0.40,95%CI:0.21-0.59）。　　rs1799724位点3种基因型，TT型基因型在病例组中的分布频率频率明显高于对照组（P=0.003,OR=3.62,95%CI:1.15-8.07），T等位基因在病例组中的频率明显高于对照组（P=0.001,OR=1.65,95%CI:1.32-1.97）。　　2.6.2基因型的Logistic回归分析　　非条件Logistic回归分析显示，rs1799724位点，rs1800896位点的OR值分别为2.15（95%CI:1.16-2.88,P=0.0008），1.87（95%CI:0.22-0.97,P=0.03），表明这两个SNP的基因型分布与子痫前期风险相关（P<0.05）。当联合rs1800896、rs179972两个位点时，OR值达2.62（95%CI:1.38-3.00,P=0.002），将rs1800629纳入回归模型后，OR值达OR=10.6（95%CI:2.07-13.41,P=0.048）。　　【结论】　　1.2011-2014年深圳市妊娠期高血压疾病的发生率较低，但重度子痫前期的发生率较高；妊娠期高血压疾病病例中流动人口的发生率较高；妊娠期高血压疾病的分娩方式以剖宫产为主；　　2.妊娠期高血压疾病仍是引起妊娠不良结局的严重疾病，产后出血、胎盘早剥、早产及胎儿生长受限是妊娠期高血压疾病主要并发症；　　3.FⅤ基因、rs6020，MTHFR基因rs1801133，CTLA4基因rs231775SNPs可能与我国南方汉族人群子痫前期发病无明显相关；　　4.本项研究表明IL-10基因rs1800896及TNF-α基因rs1800629、rs1799724单核苷酸多态性可能与我国南方汉族人群子痫前期发病有关，rs1800896G等位基因，rs1799724TT基因型是子痫前期发生的危险因素，但这些基因多态性与子痫前期易感性的相互作用机制需要进行进一步的研究。