植物寄生线虫具有双重病原的作用。烟草寄生线虫可与多种病原物协同致病而引起复合病害。但目前国内对此类复合病害的研究较少,在根茎病害的防治中常常忽略寄生线虫对病害的促进作用。本试验采用田间调查和组织病理学相结合的方法,分析了河南部分烟区烟草根茎病害中寄生线虫的作用；采用PCR技术与形态学鉴定相结合的方法,对河南烟区的烟草寄生线虫种类进行了鉴定；初步对连作4年烟田的根结线虫病及其复合病害的防治进行了小区试验,筛选出了能够改善土壤健康,兼治线虫与真菌性根茎病害的生态制剂,并分析了不同处理对烟田土壤微生物多样性和酶活性的影响。主要研究结果如下：(1)采用田间调查和组织病理学相结合的方法,明确了烟草寄生线虫在河南部分烟区烟草根茎病害中的作用以及线虫复合病害的普遍性。对来自河南省12个产烟县的145个烟草根茎病害样品的调查发现,11个产烟县(社旗除外)存在线虫复合侵染现象,线虫复合侵染占调查根茎病害样品总数的31.72%,在豫西约有40%的烟草根茎病害由线虫复合侵染引起,豫中、豫南烟区线虫复合病害比例约有20%。说明线虫复合病害在河南省烟草上的发生比较普遍且较严重,应引起生产的高度重视。(2)采用PCR技术与形态学鉴定相结合的方法,对河南烟区的烟草寄生线虫种类进行了分析。对来自10个烟叶主产县的共12份烟草寄生线虫样本,采用简并引物TXF/TXR扩增线虫样本DNA,初步鉴定出河南烟草寄生线虫至少存在根结线虫属(Meloidogyne spp.)、胞囊线虫(.Heterodera spp.)、短体线虫属(Pratylenchus spp.)和茎线虫属(Ditylenchus spp.)。同时表明,引物TXF/TXR具有较高的特异性和灵敏性,适于快速、准确检测植物寄生线虫的属。对根结线虫样本的PCR分子检测和基于雌成虫会阴花纹的形态鉴定结果表明,4种烟草根结线虫的检出率分别为,南方根结线虫(M. incognita)57.08%,花生根结线虫(M.arenaria)21.04%,北方根结线虫(M. haapla) 18.96%;爪哇根结线虫(M javanica) 2.97%。种群分析表明河南烟草根结线虫以南方根结线虫为主,其他根结线虫的发生比例在上升。南方根结线虫(M incognita)、花生根结线虫(M. arenaria)和北方根结线虫(M. hapla)在河南广泛分布,爪哇根结线虫(M. javanica)的分布则看不出规律性。但是,所有样本均为2种或多种根结线虫的混合侵染。对来自渑池、宜阳、登封、许昌、确山5个植烟县的6份烟草根系上的胞囊进行了系统形态学鉴定。胞囊阴门锥突出,双半膜孔,下桥和泡囊发达,阴门裂长(44.1±3.5)um;阴门窗长(50.3±4.7)um、宽(36.6±4.2)um；下桥长(83.6±4.8)um、宽(11.1±0.9)um。还利用大豆胞囊线虫特异性引物对分离到的烟草胞囊线虫群体进行了分子检测。形态学和分子检测结果表明,河南省寄生烟草的胞囊线虫为大豆胞囊线虫(H.glycines Ichinohe,1952)。利用特异性引物对18S-Int/26S-Int对汝阳、登封、许昌的4份短体线虫样品进行扩增,所有4份检样均扩增出了828bp长的目标DNA片段,表明3个县存在桑尼短体线虫(P.thornei)危害,为桑尼短体线虫侵染烟草的国内首次报道。襄城县烟草线虫样品经通用引物对rDNA1/rDNA2鉴定,扩增出约940bp长的目标片段,故认为襄城烟草茎线虫为A型马铃薯腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor Tybe A),本研究是马铃薯腐烂茎线虫(D. destructor)在河南省烟草上的首次发现。(3)对连作4年、线虫病危害严重的烟田进行了病害防治小区试验。不同药剂处理后第30d、90d、采收末期的3次调查结果表明：阿维菌素持效期短,田间防果持续下降,防效26.71%-51.63%,防治效果最差。福气多表现为先显著上升后显著下降的趋势,防效61.92%-79.35%。植物源杀线和两种生态制剂(多利CX-10、多利M-20)的持效期长,防治效果稳定在74.18%-76.42%,其中多利CX-10的防效最高,为78.16%-80.53%,多利M-20为72.25%-75.46%。同时,多利M-20和多利CX-10还显著降低了烟草黑胫病的病情指数,平均相对防效在65%以上。田间调查表明,福气多和肯邦线尊对烟草会产生一定的药害,同时会降低了烟草的还苗速率;而生态制剂多利CX.10和多利M-20则加快还苗,同时可以提高烟草的抗旱能力。5种处理均可增加烟草的有效叶片数,处理间差异达极显著水平,促生作用由高到低依次为：多利CX-10>多利M-20>植物源杀线剂>福气多>肯邦线尊。土壤微生物常规分离结果表明：多利CX-10和多利M-20对土壤细菌和放线菌有强烈的激活作用,对真菌有强烈的抑制作用。多利CX-10处理后土壤细菌数量增加33.19%,放线菌数量增加了50.74%,真菌数量下降了44.59%。多利M-20处理后土壤细菌数量增加了55.88%,线菌数量增加了80.79%；真菌的数量下降了51.8%。这种对土壤微生物区系的调节作用非常有助于土壤健康的恢复。土壤酶活性测定结果也支持这一结论。多利CX-10对土壤蔗糖酶、淀粉酶、纤维素酶有强烈的激活作用,处理后土壤酶活性分别提高了63.85%、43.47%和50%。多利M-20处理在强烈激活土壤蔗糖酶和淀粉酶的同时,却对纤维素酶有强烈的抑制作用。三种土壤酶活性的变化分别为+11 1.24%、+75.42%和-38.89%。以上结果表明应用生态制剂不仅能够提高土壤酶活性和丰富土壤微生物的多样性,从而快速恢复土壤健康,具有显著兼治线虫病和其他根茎病害的效果,还有助于烟草的早发快长和抗逆性提高,值得进一步开发应用。