目的：　　 SARI基因是近年来发现的一种新型抑癌基因，它在多种正常组织细胞中均有表达，而在许多实体肿瘤中表达水平明显下降。然而其表达异常机制尚不清楚。本课题通过检测慢性髓细胞白血病患者与正常人中SARI基因中的表达水平，以慢性髓细胞白血病细胞系K562 为模型，探讨SARI基因在慢性髓细胞白血病中的作用及其表达调节可能的分子机制，为慢性髓细胞白血病基因治疗的研究提供新线索。　　 方法：　　 （1）初发慢性髓细胞白血病患者中SARI表达水平的研究：46 名初发慢性髓细胞白血病患者作为实验组，40 名健康受试者作为正常对照组。采集每位患者和健康受试者的外周血，分离单个核细胞，使用实时定量PCR技术检测两组人群中SARI基因的相对表达水平。　　 （2）SARI基因在慢性髓细胞白血病中表达异常分子机制的研究：以慢性髓细胞白血病细胞系K562 为研究模型，使用Bcr-Abl 抑制剂STI571 处理K562细胞，做时间梯度实验和浓度梯度实验。设置浓度梯度：0，0.5，1.5，2.5μM 及时间梯度：6，12，24 小时。收集各组细胞，用实时定量PCR技术检测各组SARI基因表达情况。使用PI3K 抑制剂LY294002（20μM），MEK 抑制剂PD98059（50μM），JAK 抑制剂Ag490（50μM）处理K562细胞24 小时后收集各组细胞，以未处理K562细胞作为对照组，用实时定量PCR技术检测各组SARI基因表达情况。　　 （3）SARI基因在慢性髓细胞白血病中作用的研究：使用SARI 特异性siRNA 转染 K562细胞：siRNA+转染液+K562细胞为实验组，转染液+K562细胞为Mock 对照组，未转染K562细胞为空白对照组。使用750ng SARI 特异性siRNA 转染K562细胞72 小时，用实时定量PCR技术检测K562细胞中SARI基因表达水平，确定其干扰效率。用STI571（2.5μM）分别处理实验组和Mock 对照组K562细胞24 小时，用流式细胞术检测两组K562细胞凋亡率及STI571 处理后两组K562细胞的凋亡率。　　 结果：　　 1.初发慢性髓细胞白血病患者中SARI表达水平的研究与正常对照组（n=40）相比，实验组（n=46）SARI基因表达在mRNA水平明显降低，三次实验结果所得数据经过Students unpaired t-test分析，p<0.001，两组间具有明显的统计学差异。　　 2.SARI基因在慢性髓细胞白血病中表达异常分子机制的研究　　 2.1 STI571 对SARI基因表达的影响使用STI571（1.5μM）处理K562细胞12 小时后SARI基因mRNA表达水平开始增高。在浓度梯度实验中，各组SARI基因表达未显示明显的浓度依赖关系；在时间梯度实验中，各组SARI基因表达显示较明显的时间依赖性，随着处理时间的延长，SARI基因表达逐渐升高。　　 2.2 信号通路抑制剂对SARI基因表达的影响用MEK 抑制剂PD98059 处理24 小时后，K562细胞中SARI基因mRNA表达水平高于对照组（p<0.05）；与之相似，用JAK 抑制剂Ag490 处理24 小时后，K562细胞中SARI基因mRNA表达水平高于对照组（p<0.05）；而PI3K 抑制剂处理24 小时后，K562细胞中SARI基因mRNA表达水平下降。　　 3.SARI基因在慢性髓细胞白血病中作用的研究　　 3.1 SARI 特异性siRNA 干扰效应　　 与Mock 对照组相比，使用SARI 特异性siRNA(750ng)转染K562细胞72 小时后，SARI基因mRNA表达水平降低了72％（p<0.001）；而空白对照组和Mock 对照组SARI基因mRNA表达水平无明显差异（p>0.05）。　　 3.2 SARI 干扰对K562细胞凋亡的影响　　 使用流式细胞术检测各组凋亡率，与Mock 对照组相比，实验组 K562细胞凋亡率增加了（1.74±0.30）％，p=0.05）。　　 3.3 SARI 干扰对STI571 诱导细胞凋亡的影响　　 实验组与Mock 对照组经过STI571（2.5μM）处理24 小时后，使用流式细胞术检测两组凋亡率，与Mock 对照组相比，实验组K562细胞凋亡率减少了（（7.61±0.16）％，p<0.001）。　　 结论：慢性髓细胞白血病患者外周血SARI mRNA表达水平降低可能与该疾病的发生发展过程相关联。在慢性髓细胞白血病细胞系K562中，SARI基因表达下调与Bcr-Abl抑制作用有关，而Bcr-Abl下调SARI基因表达可能是通过其下游MEK和JAK 信号通路实现的。干扰SARI基因在K562细胞中表达部分降低了STI571 诱导的凋亡作用，SARI基因可能参与了STI571 诱导细胞凋亡作用。