江西省龙虎山铁皮石斛种质资源研究

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在铁皮石斛资源的可持续开发与利用进程中,优良种质资源的收集和评价技术是发展铁皮石斛种植业的重要基础。目前,由于研究人员主要根据铁皮石斛中的多糖质量分析、产能、适应性能力、抗病能力、抗低温能力等进行野生种质资源的评价,从而选育出具有区域特性的优良品种,但研究人员均未从铁皮石斛药效与用途需求两方面来进行种质资源的评价。因此,本文通过药效与用途研究来开展铁皮石斛种质评价,从而建立完善的铁皮石斛质量评价体系。该体系对铁皮石斛优良品种的选育以及药用质量与产量的提高具有重要的理论价值和现实意义。本文采用DNA分子条码鉴定技术对龙虎山铁皮石斛进行分类,并对其农艺性状、化学活性成分以及体外药效进行研究,意在建立基于量效的铁皮石斛种质评价体系,从而筛选出遗传稳定性好,药用成分含量高且具有显著药用价值的铁皮石斛品种,为江西省优质铁皮石斛的品种选育提供参考。本课题的主要研究进展如下:1、江西龙虎山铁皮石斛种质资源的调查与收集:通过DNA条码鉴定技术对来自龙虎山的28个石斛样品进行鉴定分类,共确定了10个石斛品种,其中9个为铁皮石斛,1个为霍山石斛。在9个铁皮石斛品种中,有6个属于龙虎山特有的铁皮石斛品种。2、龙虎山铁皮石斛种质资源农艺性状研究:不同种质的铁皮石斛在茎长、茎粗、花型、花序、叶片形状、分蘖数、产量、叶片指数等性状上具有显著差异,其中以12号、18号、21号品种表现最佳,且遗传性状较为稳定。3、龙虎山铁皮石斛种质资源活性成分的研究:不同种质铁皮石斛的多糖含量、石斛碱及醇溶性浸出物含量差异较大,其中以1号、3号、21号种质表现最佳。4、龙虎山铁皮石斛种质资源中有效成分的体外药效研究:我们利用CCK8试剂检测十三种铁皮石斛多糖提取物对小鼠脾细胞增殖的影响,结果表明18号、29号、21号、31号、20号、3号的多糖提取物具有明显促进小鼠脾细胞增殖的作用,且对18号品种的多糖提取物呈剂量依赖性;并对铁皮石斛中多糖类和芪类提取物的抗肿瘤活性进行检测,试验结果显示,十三种铁皮石斛芪类提取物均能抑制肿瘤细胞增殖,其中18号、30号和21号品种的提取物对CRL5803细胞的抑制作用较为显著且表现出一定的剂量依赖性,通过对不同浓度铁皮石斛提取物处理过的CRL5803细胞进细胞周期分析发现,CRL5803细胞阻滞在G2/M期。研究结果表明铁皮石斛提取物能有效抑制肿瘤细胞增殖,且促进小鼠脾细胞增殖。
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