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目的：宫颈癌是危害女性身心健康的主要恶性肿瘤之一，在人类恶性肿瘤中位于第五位，在女性恶性肿瘤中其发病率与病死率居于第二位。TPX2是一种严格受到细胞周期调控的核增殖相关蛋白，参与细胞有丝分裂中纺锤体及微管的装配过程。TPX2基因扩增或过表达将导致中心体扩增、染色体分离异常、DNA异倍体及多倍体的出现。目前已证实TPX2在多种肿瘤组织及肿瘤细胞系中存在扩增现象或表达水平上调。本课题组的前期体外实验证明了TPX2在宫颈癌组织中存在着明显的表达上调现象，TPX2-siRNA能有效抑制宫颈癌细胞系Hela细胞表达TPX2mRNA和蛋白质、降低细胞增殖和侵袭能力，有利于抑制肿瘤生长，甚至达到消除肿瘤的目的。本研究采用本课题组设计的TPX2-siRNA及转染的Hela细胞系，从体内实验角度研究TPX2-siRNA对TPX2蛋白质表达的沉默效应、肿瘤生长抑制作用及治疗的效果。方法：选取4周龄雌性裸鼠16只，随机分为4组（TPX2-siRNA转染组、TPX2-siRNA治疗组、空白对照组、阴性siRNA对照组），每组4只。于裸鼠右前肢腋窝皮下按组别分别接种已转染TPX2-siRNA的Hela细胞系（TPX2-siRNA转染组）及未转染Hela细胞系（TPX2-siRNA治疗组、空白对照组、阴性siRNA对照组）建立肿瘤模型，并于接种后第6天开始，TPX2-siRNA治疗组给予TPX2-siRNA-脂质体混合物溶液0.1ml（含TPX2-siRNA10ug）瘤体局部注射，阴性siRNA对照组给予对照siRNA-脂质体混合物溶液0.1ml（含阴性对照siRNA10ug）瘤体局部注射，空白对照组给予培养基0.1ml瘤体局部注射，TPX2-siRNA转染组仅进行观察不给予特殊处理。以上治疗方法，每4天给予一次，共计给予6次，第30天断颈处死所有组别裸鼠结束实验。连续观察30天，记录移植瘤出现的时间，游标卡尺测量瘤体的长轴和短轴计算移植瘤体积，绘制肿瘤生长曲线并对数据进行统计学分析。处死裸鼠后，测量各组移植瘤标本的长短轴及重量，对移植瘤标本的体积及重量进行统计学分析，并通过对移植瘤的组织切片行免疫组化染色研究TPX2-siRNA对TPX2蛋白质表达的抑制情况。结果：1裸鼠皮下移植瘤成瘤时间及活体生长情况。TPX2-siRNA转染组、TPX2-siRNA治疗组、空白对照组及阴性siRNA对照组分别在接种9.37±0.75、4.37±0.48、4.50±0.07、4.12±0.25天出现移植瘤结节并随时间推移逐渐增大，成瘤率均为100%。TPX2-siRNA转染组与TPX2-siRNA治疗组、空白对照组及阴性siRNA对照组的成瘤时间两两比较，TPX2-siRNA转染组裸鼠成瘤时间延迟，其差异均具有统计学意义（P＜0.05）。TPX2-siRNA转染组和TPX2-siRNA治疗组、空白对照组和阴性siRNA对照组相比较，移植瘤的生长趋势均无明显统计学差异（P＞0.05）。TPX2-siRNA转染组和TPX2-siRNA治疗组移植瘤的生长趋势与空白对照组及阴性siRNA对照组相比有差异，其差异具有统计学意义（P＜0.05）（见Table2）。2裸鼠皮下移植瘤生长曲线。TPX2-siRNA转染组和TPX2-siRNA治疗组裸鼠皮下移植瘤体积及生长速度与空白对照组和阴性siRNA对照组相比明显降低。TPX2-siRNA治疗组移植瘤生长速度平稳、缓慢。TPX2-siRNA转染组接种经转染的Hela细胞的初期，移植瘤生长速度低于TPX2-siRNA治疗组，实验后期其生长速度有加快趋势，但仍然低于空白对照组和阴性对照。3TPX2的表达对裸鼠移植瘤体积及重量的影响。TPX2-siRNA转染组移植瘤最终体积为（61.875±25.702）mm3，重量为（52.925±18.892）g。TPX2-siRNA治疗组移植瘤最终体积为（58.6175±27.231）mm3，重量为（41.950±12.972）g。空白对照组移植瘤最终体积为（608.250±359.378）mm3，重量为（407.800±174.339）g。阴性siRNA对照组移植瘤最终体积为（569.625±196.221）mm3，重量为（452.700±111.722）g。TPX2-siRNA转染组和TPX2-siRNA治疗组、空白对照组和阴性siRNA对照组相比较移植瘤最终的体积和重量均无明显统计学差异（P＞0.05）。TPX2-siRNA转染组与TPX2-siRNA治疗组移植瘤的最终体积和重量明显小于空白对照组及阴性siRNA对照组，其差异具有统计学意义（P＜0.05）。4免疫组化检测各组移植瘤中TPX2蛋白质的表达情况。TPX2在TPX2-siRNA转染组移植瘤组织切片中的染色阳性率＜10%。TPX2在TPX2-siRNA治疗组、空白对照组、阴性siRNA对照组移植瘤组织切片中的染色阳性率分别为0%，40.3%，42.2%，在TPX2-siRNA治疗组移植瘤组织切片的细胞核中未见棕黄色颗粒样物。在空白对照组和阴性siRNA对照组的移植瘤组织切片中TPX2蛋白表达阳性染色均位于细胞核内，呈深染的棕黄色颗粒样物质。结论：裸鼠皮下移植瘤的体内试验表明，TPX2-siRNA能有效的降低Hela细胞的成瘤时间，抑制裸鼠皮下移植瘤的生长速度，下调移植瘤细胞中TPX2蛋白质的表达水平。TPX2有望成为宫颈癌治疗的新靶点。