一、临床研究部分　　目的：　　1.通过观察参桃软肝丸治疗中晚期原发性肝癌患者临床疗效,以总生存期作为研究终点，探讨健脾祛瘀法治疗中晚期原发性肝癌的有效性及安全性。　　2.挖掘、整理周岱翰教授经验的基础上，探寻对肝功能Child分级B、C级肝癌患者有效且安全的治疗方法/药物/治疗策略。　　方法：将符合纳入标准肝功能ChildB、C级原发性肝癌患者110例，采用随机分组法以2:1比例分为治疗组和对照组。以前瞻性随机对照的方法观察健脾祛瘀法立方的参桃软肝丸对于肝功能分级ChildB、C级中晚期原发性肝癌的近期疗效、安全性、远期疗效的影响。两组患者均采用相同的西医治疗策略，治疗组加以参桃软肝丸口服治疗。　　观察主要内容：1.肝功能状态、肝纤维化指标、肝储备功能等指标；2.远期疗效评价指标：总生存期，中位生存期等，并以单因素生存分析、多因素回归分析其可能的相关因素；　　次要观察指标：1.近期疗效指标(包括一般情况、临床症状、体力状态、瘤体大小等)；2.两组患者近期不良反应等；全面评价参桃软肝丸对中晚期肝癌患者，尤其肝功能分级为Child B、C级患者临床疗效、安全性。　　结果：　　1.近期疗效评价　　（1）一般情况。两组患者治疗前后在生命体征的方面并无明显差异。两组患者的体重，因无法确认是否为干体重，未予统计分析。　　（2）肝癌相关中医症状积分。治疗组治疗后肝癌相关症状积分较对照组治疗后相比明显降低，认为参桃软肝丸可部分减轻中晚期肝癌患者相关症状。　　（3）肿瘤客观评价指标。在瘤体客观稳定率评价中，治疗组有效率及稳定率治疗组虽均较对照组高，但两组比较 P＞0.05，认为无统计学差异。肝癌相关肿瘤指标：两组患者治疗前后 AFP及α-L岩藻糖苷酶（AFU）比较均提示无显著性差异。　　（4）体力状态评分。两组患者治疗前后评分比较均无显著性差异。进一步亚组分析提示治疗后，中西结合亚组与西医亚组比较，P=0.041＜0.05。提示参桃软肝丸联合西医治疗，能减少抗肿瘤治疗对体力状态评分的影响。　　（5）肝功能相关指标。Child-pugh评分：治疗组治疗前后比较,认为有统计学差异，两组治疗后比较亦有统计学差异。Child分级情况的比较：两组治疗后比较，也有统计学意义。肝功能相关指标的影响提示：治疗后两组间比较有显著性差异的指标主要有ALT、ALP、TB、PA及NH3水平，治疗组治疗后与治疗前对比有显著性差异的相关肝功能指标有A/G、PA、LDH水平，而对照组中治疗前与治疗后比较有显著性差异的指标有ALT、ALP、TB、ALB、A/G、PA、TBA、LDH及 NH3水平。对肝合成、排泄、解毒功能相关酶学指标进行拆分组合分析，提示参桃软肝丸的肝保护可能通过肝合成、排泄、解毒功能相关酶学指标的影响实现。肝纤维化和肝硬化相关指标，以HA、PCIII、LN为主，检测结果提示：两组患者在治疗前后肝纤维化相关指标均较正常值水平明显增高，治疗后两组比较存在显著性差异的指标主要有HA、LN。肝储备功能以PA及肝功能Child-pugh分级水平进行分析。两组患者治疗后PA水平及肝功能Child分级均有显著性差异。　　2.近期安全性评价。在治疗组中医亚组中见2例患者出现I～II度恶心和暂时性呕吐，无需特别处理，提示参桃软肝丸安全性较好。　　3.远期疗效　　（1）3月、6月、1年生存率。治疗组3月、6月、1年生存率分别为65.22%，53.62%，27.54%，对照组为：60.61%，48.49%和24.24%，两组间比较经x2检验，无显著性差异。中医药干预并未影响两组患者3月、6月、1年生存率。　　（2）单因素生存分析。两组患者单因素生存分析提示两组患者的生存曲线有一定分离，但 P=0.316＞0.05，两组患者生存率无显著性差异。进一步亚组分析提示，不同治疗亚组患者生存期有显著差异。不同的肝功能和不同BCLC分期对两组患者生存期影响存在显著性差异。而其他因素如：性别、年龄、既往治疗情况、AFP状态、瘤体大小、入组时KPS评分水平等6个因素在两组比较无显著性差异。两组患者总生存期与中位生存期：在亚组分析中，中医亚组与最佳支持治疗亚组；肝功能ChildC分级，和BCLC分期中D期患者中，两组间中观察到了生存期的显著性差异。中西医亚组和西医亚组间比较，ChildB期、BCLCB、C期患者中，治疗组患者在总生存期与中位生存期均有延长，但不存在显著性差异，提示参桃软肝丸配合最佳支持治疗可延长肝功能ChildC级或BCLC分期D期肝癌患者生存期。　　(3)两组患者预后多因素回归分析。多因素回归分析结果提示亚组相关治疗因素及肝功能分级状态、BCLC分期均与预后有显著相关性。　　结论：参桃软肝丸对中晚期肝癌患者，特别是肝功能分级为 Child B、C级患者在近期疗效方面可部分减轻/缓解患者症状，改善患者体力状态，稳定瘤体。在对肝功能各指标的影响中，参桃软肝丸的肝保护可能通过肝合成、排泄、解毒功能相关酶学指标的影响实现，此外其对于肝储备能力有一定保护及部分改善肝癌患者肝纤维化相关指标的作用。近期不良反应提示：参桃软肝丸安全性较高。远期疗效评价方面：参桃软肝丸对肝功能分级ChildC级与BCLC分期D期者生存期显著差异，对于其他亚组分析，生存期未见显著优势。而入组临床试验中不同的亚组、肝功能分级状态以及肝癌BCLC分期是本研究中肝癌患者预后的相关因素。　　具有健脾祛瘀功效的参桃软肝丸能改善症状，稳定瘤体，对肝功能、肝储备功能有一定保护作用，对肝纤维化可能有改善或逆转作用，并可延长对晚期肝癌患者生存期。　　二、实验研究部分:　　目的：通过实验研究初步探讨参桃软肝丸对 H22荷瘤小鼠肝癌细胞抑瘤率、端粒酶活性活性水平表达的影响进一步探讨其治疗肝癌可能的作用机理。　　方法：以造模成功H22肝癌荷瘤小鼠随机分为5组：空白对照组、参桃软肝丸低剂量组、参桃软肝丸中剂量组、参桃软肝丸高剂量组和5Fu组(阳性对照组)，各8只。自造模第2天开始与对应药物灌胃，空白对照组予等量生理盐水，中药低、中、高剂量组根据小鼠与人体表面积比例，按不同浓度中药溶液灌胃，5Fu组予5FU腹腔注射20mg/kg/日，连用10天。给药结束后24h，各组小鼠颈椎脱臼法处死，称重及测量肿瘤体积，计算抑瘤率。PCR测定各组小鼠肿瘤组织端粒酶活性。　　结果：参桃软肝丸低、中、高剂量组、5Fu组在小鼠一般情况较空白对照组佳，在5组小鼠的瘤重，参桃软肝丸中剂量组、高剂量组及5Fu组与空白对照组有显著性差异，抑瘤率方面，参桃软肝丸低剂量组22.17%，参桃软肝丸中剂量组26.21%，参桃软肝丸高剂量组为36.07%，5Fu组为40.69%。端粒酶活性检测，参桃软肝丸中剂量组、参桃软肝丸高剂量组、5Fu组泳道灰度值与空白对照组有显著性差异（P＜0.05）。　　结论：不同浓度的参桃软肝丸均对 H22肝癌荷瘤小鼠的肿瘤生长有较好的抑制作用，尤以高剂量组为佳，其对肿瘤的抑制可能与其对肝癌细胞端粒酶活性水平影响相关。