【摘 要】
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美藤果是近年来从瓜尔多引进的一种高脂肪高蛋白油料作物,被批准为国家新资源食品。美藤果种仁经低温压榨油脂后得到的饼粕约含60%的高营养蛋白质,目前主要用作饲料加工,造成
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美藤果是近年来从瓜尔多引进的一种高脂肪高蛋白油料作物,被批准为国家新资源食品。美藤果种仁经低温压榨油脂后得到的饼粕约含60%的高营养蛋白质,目前主要用作饲料加工,造成资源浪费。把美藤果饼粕中的蛋白制成多肽,用于开发多肽产品,一方面有助于开发深加工、高附加值的美藤果产品,实现原料的综合利用;另一方面可以加速我国多肽产品市场的发展。本论文采用酶解技术对美藤果多肽的制备进行研究,通过诱导淋巴细胞增殖与细胞因子的释放,初步评价美藤果多肽的免疫调节作用。本文得出如下结论:(1)碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶6种蛋白酶中,碱性蛋白酶最适宜用于美藤果多肽的制备。(2)添加亚硫酸钠、添加表面活性剂、超声处理3种前处理方式中超声处理对美藤果蛋白水解度的提高最明显。添加0.15-0.45%的亚硫酸钠均能提高蛋白水解度,其中0.25%的添加量可使水解度提高10%;CTAB、SDS、吐温-80、甜菜碱四种表面活性剂中只有CTAB能显著提高美藤果蛋白水解度,提高率为12%;20-80 Hz超声处理15 min均能大幅提高美藤果蛋白水解度,40 Hz超声处理可使蛋白水解度比单独酶解处理的提高50%以上。(3)超声辅助酶法制备美藤果多肽最优工艺条件为:40 Hz超声处理美藤果果粕15 min后添加7500 U/g碱性蛋白酶,50℃下酶解6 h,得到美藤果蛋白水解度为17.92%,肽液中94.64%的相对分子量集中在1000 Da以下。(4)通过体外淋巴细胞免疫实验发现,美藤果多肽具有一定的免疫调节作用。美藤果水解多肽在5-640μg/mL浓度范围内能显著促进脾淋巴细胞增殖,中低剂量时有明显的量效关系;中高剂量(20-640μg/mL)的美藤果水解多肽与脂多糖(LPS)共同诱导淋巴细胞具有明显的协同刺激作用(p<0.05),中剂量(20-160μg/mL)与刀豆蛋白(ConA)共同诱导也具有明显的促增殖作用(p<0.05);一定浓度的美藤果水解多肽对促进小鼠淋巴细胞分泌白介素IL-2和肿瘤坏死因子TNF-α也有积极的作用。
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