苦参对大鼠胃肠道菌群结构的影响

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目的:考察口服苦参干预下大鼠胃肠道菌群多样性的影响,以及胃肠道中优势细菌数量的变化情况,探讨苦参对大鼠胃肠道菌群结构的影响。  方法:采用高剂量、中剂量、低剂量苦参水煎剂灌胃干预SPF级别SD大鼠,并设空白对照组以及抗生素对照组。在灌胃第7天、14天、21天结束时随机抽取各组动物进行取材,采集大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠及内容物,提取各样本中的细菌DNA,采用细菌16s rDNA V3区通用引物进行PCR扩增,将PCR扩增后的产物进行变形梯度凝胶电泳,利用Quantity one分析肠道菌群多态性;采用实时荧光定量PCR技术检测胃肠道中大肠杆菌、肠球菌、乳酸菌、梭菌属及拟杆菌的起始拷贝数,并对其数量变化进行统计学分析。采用高通量测序各组21天样本,整体性分析肠道菌群结构的变化。  结果:1.苦参给药7天,胃部低、高剂量组乳酸菌减少(P<0.05),中剂量组梭菌属明显减少(P<0.01),高剂量组明显增多(P<0.01);十二指肠各剂量组大肠杆菌明显增多(P<0.01);空肠部位各剂量组肠球菌明显减少(P<0.01),低、高剂量组梭菌属明显减少(P<0.01);结肠部位低、中剂量组大肠杆菌明显减少,低、高剂量组梭菌属增多(P<0.05)。2.苦参给药14天,十二指肠各剂量组大肠杆菌增多(P<0.05),拟杆菌明显减少(P<0.01);空肠低、中剂量组大肠杆菌明显减少(P<0.01),梭菌属增多(P<0.05),中、高剂量组乳酸菌增多(P<0.05),各剂量组肠球菌明显增多(P<0.01);回肠各剂量组乳酸菌减少(P<0.05);结肠低、中剂量组大肠杆菌和乳酸菌减少(P<0.05),各剂量组肠球菌和梭菌属减少(P<0.05)。3.苦参给药21天,十二指肠各剂量组大肠杆菌及乳酸菌减少(P<0.01),高剂量组梭菌属明显减少(P<0.01);空肠中剂量组拟杆菌数量明显减少(P<0.01),高剂量组肠球菌和梭菌属明显减少(P<0.01);回肠低剂量组肠球菌和拟杆菌数量减少(P<0.01),各剂量组乳酸菌和梭菌属数量减少(P<0.01);结肠部位各剂量组大肠杆菌明显减少(P<0.01),低、高剂量组肠球菌和梭菌属明显减少(P<0.01)。4.PCR-DGGE结果显示,雌鼠苦参给药各部位菌群丰度较空白组有所减少,雄鼠肠道菌群较雌鼠丰度高,变化趋势更显著;雄鼠21天各组高通量测序结果与DGGE结果相似,苦参给药会对肠道菌群的结构造成较大影响。  结论:苦参对大鼠胃肠道菌群结构的变化有较大影响,雄鼠肠道菌群较雌鼠丰度高;长时间的苦参给药会导致胃部、十二指肠及结肠的菌群紊乱;苦参使大鼠胃部乳酸菌数量减少,十二指肠内的大肠杆菌数量增多,空肠肠球菌及乳酸菌数量增多,结肠肠球菌数量减少,长时间大剂量给药会导致肠道各部位梭菌属的紊乱。
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